[發明專利]一種煙草HPLC指紋圖譜數據庫的建立方法及應用

有效

• 申請號: 201110365632.4
• 申請日: 2011-11-17
• 公開（公告）號: CN102507829A
• 公開（公告）日: 2012-06-20
• 發明（設計）人: 矣躍平;袁仕信;何云燕;劉磊;尹曉東;唐徐紅;涂書新;何結望;閻鐵軍;李琳
• 申請（專利權）人: 云南省煙草煙葉公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 昆明正原專利代理有限責任公司 53100
• 代理人: 徐玲菊

1.一種煙草HPLC指紋圖譜數據庫的建立方法，其特征步驟在于：

1)、烤煙成分提取：以甲醇為提取劑，提取條件為：液固比v/g為20－40，提取溫度為20～30℃，超聲波提取時間50～60min，離心分離后取上清液過0.45μm的濾膜，濾液為待測溶液；

2)、HPLC指紋圖譜分析：取步驟1)的待測溶液，采用HPLC進行指紋圖譜分析，得到烤煙原始指紋圖譜數據庫，分析條件為：C18色譜柱，流動相A為乙腈，流動相B為0.08～0.2%?的甲酸；梯度洗脫程序：不同分析時間時，流動相A與B體積比分別是：0min時為0～5:95～100，30min時為?20～25:75～80，45min時為30～40:60～70，55min時為50～60:40～50并保持5?min，停止色譜分析；65min時，A與B的體積比為0～5:95～100；保持2min后運行5min；其體積流量范圍：0.8－1.2?ml/min；柱溫：20～30℃，檢測波長：250nm；

3)、指紋圖譜分時數據庫的建立：通過計算機編程技術，將步驟2）得到的烤煙原始指紋圖譜數據庫轉換成烤煙指紋圖譜分時數據庫；

4)、主成份－聚類分析法判定煙草品質級別：采用主成份分析法對步驟3）的烤煙指紋圖譜分時數據庫進行分析，提取主成份，對不同樣品的主成份值進行聚類分析；或者直接對步驟3）的烤煙指紋圖譜分時數據庫指標進行聚類分析，以達到對不同品質的煙葉進行分類的目的。

2.根據權利要求1所述的煙草HPLC指紋圖譜分時數據庫的建立方法，其特征在于所述步驟1）的超聲波頻率為20～80MHz，離心機離心力為5,000～12,000?g，離心時間8～15min。

3.根據權利要求1所述的煙草HPLC指紋圖譜分時數據庫的建立方法，其特征在于所述步驟3）的分時數據庫的時長為1-5min。

4.一種如權利要求1所述的方法在烤煙品質分類及品牌煙葉識別中的應用。