[發(fā)明專利]反轉錄PCR分析IVF單個植入前胚胎的基因表達中的反轉錄反應體系無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201110362856.X | 申請日： | 2011-11-14 |
| 公開（公告）號： | CN102864211A | 公開（公告）日： | 2013-01-09 |
| 發(fā)明（設計）人： | 金星亮;白麗君;常菁 | 申請（專利權）人： | 江蘇邁健生物科技發(fā)展有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 214000 江蘇省*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 轉錄 pcr 分析 ivf 單個 植入 胚胎 基因 表達 中的 反應 體系 | ||
【權利要求書】：
1.一種反轉錄PCR分析IVF單個植入前胚胎的基因表達方法中的反轉錄反應體系，所述分析基因表達方法包括步驟：
標本收集及純化；
反轉錄反應；
反轉錄陰性對照和陽性對照；
反轉錄產(chǎn)物進行實時定量PCR檢測；
使用組織細胞RNA進行優(yōu)化PCR條件；
在該條件下同時放大擴增陰性對照和陽性對照；
采用相對定量的方法檢測目的基因的表達量；以及
進行統(tǒng)計學分析；
其中，所述反轉錄反應的反應體系為：
模板1.3μl，反轉錄酶2.5U，隨機引物2.5μM，dNTPs0.5μM，Mg++4mM，RNase抑制劑0.2U，10xPCR緩沖液0.4μl，加Milli?Q超純水至終體積4μl。
2.如權利要求1所述的反轉錄PCR分析IVF單個植入前胚胎的基因表達方法中反轉錄反應體系，其中所述反轉錄反應的反應條件為：
25℃下10分鐘；然后42℃下2分鐘；然后99℃下2分鐘以及4℃下10分鐘。
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