[發(fā)明專利]一種IgG含量的檢測方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110362205.0
• 申請日: 2011-11-16
• 公開（公告）號: CN102507958A
• 公開（公告）日: 2012-06-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張慧東;卜英俊;王彬;陳芳;顧培華
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇星馳生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/531
• 代理公司: 南京蘇高專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32204
• 代理人: 柏尚春

1.一種IgG含量的檢測方法，其特征在于：包括如下步驟：

(1)將標(biāo)準(zhǔn)IgG溶于緩沖液中配制成多個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，并分別檢測每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液中的紅細(xì)胞基數(shù)后制作標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；

(2)將樣品IgG與過量濃度的SPA混合反應(yīng)，制備IgG-SPA復(fù)合物；

(3)將IgG-SPA復(fù)合物與過量豬血清補(bǔ)體反應(yīng)，產(chǎn)生的補(bǔ)體結(jié)合物與紅細(xì)胞發(fā)生溶血反應(yīng)，計(jì)算紅細(xì)胞基數(shù)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線對照即得樣品IgG含量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于：所述步驟(1)中標(biāo)準(zhǔn)曲線圖的制作方法如下：首先制備IgG標(biāo)準(zhǔn)溶液：在緩沖液中溶解IgG標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)分別配制成為1mg/ml、0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.1mg/ml、0.05mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后通過IgG-SPA結(jié)合反應(yīng)及補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)得到紅細(xì)胞數(shù)量，從而制備標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于：步驟(2)中制備IgG-SPA復(fù)合物的方法為：首先采用緩沖液配制與步驟(1)中標(biāo)準(zhǔn)溶液對應(yīng)濃度的樣品溶液，放入超聲波清洗機(jī)中超聲2-20min，精確吸取20-200ul樣品備用；然后采用緩沖液配制5倍以上IgG樣品溶液濃度的SPA溶液，放入超聲波清洗機(jī)中超聲2-20min，精確吸取20-200ul?SPA備用；將備用的IgG與備用的SPA溶液進(jìn)行對應(yīng)混合，反應(yīng)生成IgG-SPA復(fù)合物。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于：步驟(3)中將IgG-SPA復(fù)合物與過量豬血清補(bǔ)體反應(yīng)，產(chǎn)生的補(bǔ)體結(jié)合物與紅細(xì)胞發(fā)生溶血反應(yīng)的步驟為：首先采用緩沖液配制5倍以上IgG樣品溶液濃度的血清補(bǔ)體溶液，放入超聲波清洗機(jī)中超聲2-20min，精確吸取20-200ul血清補(bǔ)體溶液備用；然后將步驟(2)中的IgG-SPA復(fù)合物與備用的血清補(bǔ)體溶液反應(yīng)生成補(bǔ)體結(jié)合物；再精確吸取20-200ul補(bǔ)體結(jié)合物與標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞發(fā)生溶血反應(yīng)。

5.根據(jù)權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的檢測方法，其特征在于：所述的緩沖液為PH＝6.0的0.2mol/L磷酸鹽緩沖液。