[發(fā)明專利]一種多表位TK1抗體的制備及其在評估腫瘤患者治療效果中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110353975.9
• 申請日: 2011-10-28
• 公開（公告）號: CN102516390A
• 公開（公告）日: 2012-06-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 周際;李勁;斯文·斯庫格;艾倫·何
• 申請（專利權(quán)）人: 周際;李勁;斯文·斯庫格;艾倫·何
• 主分類號: C07K16/40
• 分類號: C07K16/40;C12N9/12;C07K16/02;G01N33/573;G01N33/574
• 代理公司: 北京安博達知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11271
• 代理人: 徐國文

1.一種高特異性、高靈敏度的抗人TK1抗體，其特征在于所述抗體選擇的TK1蛋白包括：TK1蛋白質(zhì)，具有酶活性/非活性的單體、2或4聚體TK1蛋白質(zhì)，或TK1蛋白質(zhì)與其他分子形成的蛋白復(fù)合物或抑制物。

2.一種抗原決定簇，所述決定簇包括人宮頸癌細胞TK1單體N端23肽、C端20肽和C端28肽，其氨基酸序列分別如下：N端23肽(3-25)：CINLPTVLPGSPSKTRGQIQVIL；C端20肽(206-225)：CPVPGKPGEAVAARKLFAPQ和C端28肽(198-225)：AGPDNKENCPVPGKPGEAVAARKLFAPQ。

3.一種利用權(quán)利要求2所述的抗原決定簇制備抗體的方法，其特征在于所述方法包括利用權(quán)力要求2所述的三段多肽免疫序列分別與KLH交聯(lián)，分別免疫母雞，提取卵黃液體，采用水萃取制備抗體溶液，分別用所述的抗原決定簇制備的親和層析柱純化抗體，初篩出高特異性、高靈敏度的抗體。

4.一種利用權(quán)利要求3所述的方法所得的組合抗體制備的高特異性、高靈敏度的多表位抗人TK1-IgY抗體，其特征在于所述的抗體按質(zhì)量百分數(shù)計：所述23肽免疫的單一抗體為30％～50％，所述20肽免疫的單一抗體為25％～40％，28肽免疫的單一抗體為20％～30％。

5.一種利用權(quán)利要求3所述的方法所得的組合抗體制備的高特異性、高靈敏度的多表位抗人TK1-IGY抗體，其特征在于所述的抗體按質(zhì)量百分數(shù)計：所述23肽免疫的單一抗體為45％～50％，所述20肽免疫的單一抗體為30％～35％，28肽免疫的單一抗體為25％～30％。

6.一種用權(quán)利要求3至5中任一權(quán)利要求所述的抗體，其特征在與所述的抗體選擇的TK1蛋白包括：TK1蛋白質(zhì)，具有酶活性/非活性的單體、2或4聚體TK1蛋白質(zhì)，或TK1蛋白質(zhì)與其他分子形成的蛋白復(fù)合物或抑制物。

7.一種對權(quán)利要求4中所述的配位組合的抗人TK1-IgY抗體的檢測方法：所述檢測方法包括硝酸纖維素膜點印染/免疫增強發(fā)光檢測系統(tǒng)(ECL)的縮時檢測方法、抗體直接標(biāo)記生物素方法。

8.一種利用權(quán)力要求4至5中任一權(quán)利要求所述的組合抗人TK1-IgY抗體與化學(xué)發(fā)光檢測系統(tǒng)結(jié)合用于評估腫瘤患者的治療效果的試劑盒。