[發明專利]一種多表位TK1抗體的制備及其在評估腫瘤患者治療效果中的應用

有效

• 申請號: 201110353975.9
• 申請日: 2011-10-28
• 公開（公告）號: CN102516390A
• 公開（公告）日: 2012-06-27
• 發明（設計）人: 周際;李勁;斯文·斯庫格;艾倫·何
• 申請（專利權）人: 周際;李勁;斯文·斯庫格;艾倫·何
• 主分類號: C07K16/40
• 分類號: C07K16/40;C12N9/12;C07K16/02;G01N33/573;G01N33/574
• 代理公司: 北京安博達知識產權代理有限公司 11271
• 代理人: 徐國文

1.一種高特異性、高靈敏度的抗人TK1抗體，其特征在于所述抗體選擇的TK1蛋白包括：TK1蛋白質，具有酶活性/非活性的單體、2或4聚體TK1蛋白質，或TK1蛋白質與其他分子形成的蛋白復合物或抑制物。

2.一種抗原決定簇，所述決定簇包括人宮頸癌細胞TK1單體N端23肽、C端20肽和C端28肽，其氨基酸序列分別如下：N端23肽(3-25)：CINLPTVLPGSPSKTRGQIQVIL；C端20肽(206-225)：CPVPGKPGEAVAARKLFAPQ和C端28肽(198-225)：AGPDNKENCPVPGKPGEAVAARKLFAPQ。

3.一種利用權利要求2所述的抗原決定簇制備抗體的方法，其特征在于所述方法包括利用權力要求2所述的三段多肽免疫序列分別與KLH交聯，分別免疫母雞，提取卵黃液體，采用水萃取制備抗體溶液，分別用所述的抗原決定簇制備的親和層析柱純化抗體，初篩出高特異性、高靈敏度的抗體。

4.一種利用權利要求3所述的方法所得的組合抗體制備的高特異性、高靈敏度的多表位抗人TK1-IgY抗體，其特征在于所述的抗體按質量百分數計：所述23肽免疫的單一抗體為30％～50％，所述20肽免疫的單一抗體為25％～40％，28肽免疫的單一抗體為20％～30％。

5.一種利用權利要求3所述的方法所得的組合抗體制備的高特異性、高靈敏度的多表位抗人TK1-IGY抗體，其特征在于所述的抗體按質量百分數計：所述23肽免疫的單一抗體為45％～50％，所述20肽免疫的單一抗體為30％～35％，28肽免疫的單一抗體為25％～30％。

6.一種用權利要求3至5中任一權利要求所述的抗體，其特征在與所述的抗體選擇的TK1蛋白包括：TK1蛋白質，具有酶活性/非活性的單體、2或4聚體TK1蛋白質，或TK1蛋白質與其他分子形成的蛋白復合物或抑制物。

7.一種對權利要求4中所述的配位組合的抗人TK1-IgY抗體的檢測方法：所述檢測方法包括硝酸纖維素膜點印染/免疫增強發光檢測系統(ECL)的縮時檢測方法、抗體直接標記生物素方法。

8.一種利用權力要求4至5中任一權利要求所述的組合抗人TK1-IgY抗體與化學發光檢測系統結合用于評估腫瘤患者的治療效果的試劑盒。