[發明專利]一種分離純化草胡椒素B的方法

有效

• 申請號: 201110352904.7
• 申請日: 2011-11-09
• 公開（公告）號: CN103102347A
• 公開（公告）日: 2013-05-15
• 發明（設計）人: 楊國紅;李桂秀;楊義芳;林夢感;秦雪梅;吳春珍
• 申請（專利權）人: 上海醫藥工業研究院;中國醫藥工業研究總院
• 主分類號: C07D407/06
• 分類號: C07D407/06
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司 31002
• 代理人: 朱水平;鐘華

技術領域

本發明涉及天然藥物化學領域，具體涉及一種分離純化草胡椒素B的方法。

背景技術

草胡椒屬又稱為椒草屬(Peperomia?Ruiz?et?Pav.)是胡椒科(piperaceae)第二大屬。據《中華本草》記載，草胡椒屬草藥多性涼，具有清熱消腫、祛瘀散結、祛風除濕及愈傷止血等功效，主治關節炎、腫瘤、跌打損傷和支氣管炎等。經研究發現草胡椒素B(peperomin?B，式1)具有較好的抑制腫瘤的活性，可從草胡椒屬多種植物如石蟬草(Peperomia?dindygulensis?Miq.)中分離得到。

式1

提取草胡椒素B的工藝中，現有文獻《Bioactive?Secolignans?from?Peperomia?dindygulensis》(Jian-lin?Wu，ect.，J.Nat.Prod.2006，69：790-794)報道，可從1.75Kg石蟬草中分離得到草胡椒素B79.7mg。其方法為，將藥材粉碎，用甲醇提取3次，之后再用乙酸乙酯萃取，再將乙酸乙酯部位通過正相硅膠柱，分為12個部位，第7個部位的3.25g通過正相制備液相色譜分離，得到草胡椒素B79.7mg，其收率為2.45％(79.7mg/3.25g×100％)。

現有專利《一種分離提純草胡椒素B的方法》(楊國紅，王奇巍，林夢感等，200910049488.6，2010)報道，可從10Kg石蟬草中分離得到草胡椒素B13.2g。其方法為，將藥材粉碎，用甲醇提取，之后用氯仿萃取，再將氯仿部位通過正相硅膠柱得草胡椒素B粗品22g，取4g通過中低壓制備液相色譜分離，得到草胡椒素B2.4g，其收率為62.5％。(2.4g/4g×100％)

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于：為了克服現有的提純草胡椒素B方法的過程復雜、產品純度低、成本高、不適用于工業化生產和污染環境等缺陷，而提供了一種分離純化草胡椒素B的方法。本發明的方法，分離速度快、產品純度高、對環境污染小、生產成本低，適合于工業化生產。

本發明提供了一種分離純化草胡椒素B(peperomin?B，式1)的方法，其包括下列步驟：將含草胡椒素B的水提液上樣至大孔吸附樹脂，以乙醇和水作為洗脫劑進行梯度洗脫，收集含草胡椒素B的洗脫液，即可；所述的大孔吸附樹脂為弱極性或非極性大孔吸附樹脂；所述的梯度洗脫所用的洗脫劑的濃度范圍為純蒸餾水至95％乙醇水溶液(體積百分數)。

本發明中，所述的含草胡椒素B的水提液可從含有草胡椒素B的植物原料中提取所得，較佳地從含有草胡椒素B的植物原料中提取所得。其中，所述的含有草胡椒素B的植物原料較佳地為草胡椒、豆瓣綠、山草椒和毛豆瓣綠中的一種或多種，更佳地為石蟬草。

其中，所述的含草胡椒素B的水提液可由本領域常規的制備方法制得，較佳地包括下列步驟：將含有草胡椒素B的植物原料用水在回流條件下進行提取，合并提取液，抽濾，即可。其中，所述的水的用量可為含有草胡椒素B的植物原料的12～16倍量(質量倍數)，更佳地為含有草胡椒素B的植物原料的12倍量(質量倍數)；所述的提取次數較佳地為3～5次，更佳地為4次；所述的提取時間較佳地為每次0.5～1h，更佳地為每次0.5h；所述的抽濾較佳地為減壓抽濾；所述的抽濾次數為直到濾液中不再有濾渣(藥渣)為止，較佳地為1～2次，更佳地為2次。所述的含草胡椒素B的水提液的比重范圍較佳地為1.002-1.020，更佳地為1.005。

本發明中，所述的上樣的方法為本領域常規的上樣的方法，較佳地為濕法上樣。當上樣方法為濕法上樣時，其步驟為本領域常規的上樣步驟，較佳地按如下步驟操作：將含草胡椒素B的水提液，直接上樣；所述的上樣速度較佳地為1～3BV/h，更佳地為2BV/h。

本發明中，所述的弱極性大孔吸附樹脂，較佳地為DS401或HPD722等；所述的非極性大孔吸附樹脂，較佳地為DM130，HPD100，HPD200或HPD300等。

本發明中，所述的大孔吸附樹脂的用量可為本領域常規大孔吸附樹脂的用量，其與含草胡椒素B的水提液的體積比較佳地為1∶20～30，更佳地為1∶25，其中，含草胡椒素B的水提液中草胡椒素B的含量一般為4mg/L。

本發明中，所述的大孔吸附樹脂柱的徑長比可為本領域常規的大孔吸附樹脂柱的徑長比，較佳地為1∶8～1∶12，更佳地為1∶9。