[發(fā)明專利]十二卷類多肉植物的離體培養(yǎng)方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110346720.X
• 申請日: 2011-11-07
• 公開（公告）號: CN102499090A
• 公開（公告）日: 2012-06-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 姚德彪;顧建平
• 申請（專利權(quán)）人: 上海旭東園藝有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G31/00
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 翁若瑩

技術(shù)領(lǐng)域

?本發(fā)明涉及一種百合科十二卷屬性植物的組織培養(yǎng)快速繁殖方法。

背景技術(shù)

十二卷屬植物（學(xué)名HaworthiafasciataHaw）又名錦雞尾，為百合科十二卷屬，原產(chǎn)非洲南部地區(qū)，世界各地廣泛栽培，在我國干燥的沙漠地帶亦有野生種類（耐寒性）分布。喜溫暖干燥和陽光充足的環(huán)境，怕低溫和陰暗潮濕，生長適期3-10月，最適溫度15-25度，最高可忍受35-40度的高溫。對土壤要求不嚴，但以疏松肥沃的沙壤土為宜。

該類植物在世界上有150個種，多年生肉質(zhì)草本，無莖，葉片肉質(zhì)厚實，其葉片上有條紋，名貴品種上分布有紅色、白色、金黃色條紋，非常美麗，是不可多得的觀賞植物，作盆栽觀賞，在居室、陽臺、辦公桌上擺放呈現(xiàn)清新高雅之態(tài)。目前在日本、美國、以色列等非常盛行，我國上海、北京、廣州等大城市從國外進口種苗或直接進口商品盆花，價格昂貴，售價從數(shù)十元至上萬元不等。但此植物繁殖主要靠分株，每年繁殖量僅3-5株，名貴品種更少，故制約了應(yīng)用推廣，造成種苗奇缺，供不應(yīng)求，名貴種苗或商品盆花價格高昂，普通百姓很難消費。有關(guān)十二卷屬植物的生產(chǎn)國內(nèi)有些零星報道，但未見利用花枝嫩莖段離體培養(yǎng)及規(guī)模化生產(chǎn)的報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種十二卷屬植物的組織培養(yǎng)快速繁殖方法，以花枝嫩莖段為外植體，直接誘導(dǎo)無菌芽培育成試管苗。

為了達到上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案是提供了一種十二卷類多肉植物的離體培養(yǎng)方法，其特征在于，步驟為：

第一步：外植體的選擇與消毒

在春夏季節(jié)，選取十二卷多肉植物剛抽生的呈半木質(zhì)化的花枝，自基部整枝剪下，清洗干凈后，消毒；

第二步：無菌系的建立

將消毒過的花枝切成0.5-1.5厘米的莖段，接種于發(fā)生培養(yǎng)基上，進行初始誘導(dǎo)培養(yǎng)；

第三步：無菌系叢生芽的繼代增殖

將初始培養(yǎng)獲得的無菌芽切下，接種于第二培養(yǎng)基進行增殖，待在基部葉腋間分化出腋芽后，該腋芽即為叢生芽，繼續(xù)切割后不斷增殖；

第四步：生根培養(yǎng)

將叢生芽切成單芽，接種于第三培養(yǎng)基進行生根培養(yǎng)，在基部分分化出不定根后，試管苗培育成功；

第五步：試管苗煉苗培養(yǎng)

將生根的十二卷試管苗在苗床上作煉苗培養(yǎng)。

優(yōu)選地，第一步中所述清洗的步驟為：用洗潔精將剪下的花枝清洗兩遍，用紗布包裹后用水沖洗3小時后瀝干。

優(yōu)選地，第一步中所述消毒在無菌室超凈臺上進行，其步驟為：先用質(zhì)量百分比濃度為75%乙醇的對清洗后的花枝處理60秒，然后用與水的質(zhì)量比為1:50的潔爾敏溶液處理15分鐘，最后用質(zhì)量百分比濃度為0.1%的氯化汞溶液處理15分鐘，用無菌水沖洗三遍。

優(yōu)選地，第二步中所述發(fā)生培養(yǎng)基及第三步中所述第二培養(yǎng)基的成份相同，為加入了0.5-2.0mg/L的6-氨基腺嘌呤、0.005-0.2mg/L的荼乙酸、0.05-0.1mg/L的赤霉素、質(zhì)量百分比為3%的蔗糖及5.5g/L瓊脂粉的MS培養(yǎng)基。

優(yōu)選地，第二步中所述初始誘導(dǎo)培養(yǎng)、第三步中所述增殖及第四步中所述生根培養(yǎng)的培養(yǎng)溫度為25度，光照強度為3000LX，光照時間為12小時/天。

優(yōu)選地，第三步中所述第三培養(yǎng)為加入了0.1-0.2mg/L的荼乙酸、0.05-0.1mg/L的吲哚丁酸、質(zhì)量百分比為2%的蔗糖及5.5g/L瓊脂粉的1/2MS培養(yǎng)基。

優(yōu)選地，第五步中所述煉苗培養(yǎng)的培養(yǎng)基質(zhì)為泥炭和珍珠巖，泥炭與珍珠巖之間的質(zhì)量比為1:1，其具體步驟為：將幼苗載入培養(yǎng)基質(zhì)后澆足活棵水，用尼龍薄膜覆蓋防止幼苗失水萎焉，3天后揭去尼龍薄膜逐步煉苗。

優(yōu)選地，所述逐步煉苗的步驟為：在前7天內(nèi)，每天葉面噴水2-3次，7天后早晚各噴一次，15天后用質(zhì)量百分比濃度為0.1%的硝酸銨加質(zhì)量百分比濃度為0.1%的磷酸二氫鉀追肥，葉面及根際施肥同時進行，15天后根據(jù)基枝含水量適當澆水，保持不干不澆，澆則澆透，3個月后，試管苗可以移栽至各種容器內(nèi)作盆栽培育。

本發(fā)明利用組織培養(yǎng)技術(shù)對十二卷屬植物進行工廠化快速繁殖，具有用料少，繁殖快以及提純復(fù)壯脫病毒等優(yōu)點，可加快繁殖種苗速度，周年生產(chǎn)出優(yōu)質(zhì)種苗，對該品名花卉的開發(fā)生產(chǎn)具有積極意義。

具體實施方式

為使本發(fā)明更明顯易懂，茲以優(yōu)選實施例作詳細說明如下。

實施例1

本發(fā)明提供了一種十二卷類多肉植物的離體培養(yǎng)方法，其步驟為：

第一步：外植體的選擇與消毒