[發明專利]十二卷類多肉植物的離體培養方法

無效

• 申請號: 201110346720.X
• 申請日: 2011-11-07
• 公開（公告）號: CN102499090A
• 公開（公告）日: 2012-06-20
• 發明（設計）人: 姚德彪;顧建平
• 申請（專利權）人: 上海旭東園藝有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G31/00
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 翁若瑩

1.一種十二卷類多肉植物的離體培養方法，其特征在于，步驟為：

第一步：外植體的選擇與消毒

在春夏季節，選取十二卷多肉植物剛抽生的呈半木質化的花枝，自基部整枝剪下，清洗干凈后，消毒；

第二步：無菌系的建立

將消毒過的花枝切成0.5-1.5厘米的莖段，接種于發生培養基上，進行初始誘導培養；

第三步：無菌系叢生芽的繼代增殖

將初始培養獲得的無菌芽切下，接種于第二培養基進行增殖，待在基部葉腋間分化出腋芽后，該腋芽即為叢生芽，繼續切割后不斷增殖；

第四步：生根培養

將叢生芽切成單芽，接種于第三培養基進行生根培養，在基部分分化出不定根后，試管苗培育成功；

第五步：試管苗煉苗培養

將生根的十二卷試管苗在苗床上作煉苗培養。

2.如權利要求1所述的一種十二卷類多肉植物的離體培養方法，其特征在于，第一步中所述清洗的步驟為：用洗潔精將剪下的花枝清洗兩遍，用紗布包裹后用水沖洗3小時后瀝干。

3.如權利要求1所述的一種十二卷類多肉植物的離體培養方法，其特征在于，第一步中所述消毒在無菌室超凈臺上進行，其步驟為：先用質量百分比濃度為75%乙醇的對清洗后的花枝處理60秒，然后用與水的質量比為1:50的潔爾敏溶液處理15分鐘，最后用質量百分比濃度為0.1%的氯化汞溶液處理15分鐘，用無菌水沖洗三遍。

4.如權利要求1所述的一種十二卷類多肉植物的離體培養方法，其特征在于，第二步中所述發生培養基及第三步中所述第二培養基的成份相同，為加入了0.5-2.0mg/L的6-氨基腺嘌呤、0.005-0.2mg/L的荼乙酸、0.05-0.1mg/L的赤霉素、質量百分比為3%的蔗糖及5.5g/L瓊脂粉的MS培養基。

5.如權利要求1所述的一種十二卷類多肉植物的離體培養方法，其特征在于，第二步中所述初始誘導培養、第三步中所述增殖及第四步中所述生根培養的培養溫度為25度，光照強度為3000LX，光照時間為12小時/天。

6.如權利要求1所述的一種十二卷類多肉植物的離體培養方法，其特征在于，第三步中所述第三培養為加入了0.1-0.2mg/L的荼乙酸、0.05-0.1mg/L的吲哚丁酸、質量百分比為2%的蔗糖及5.5g/L瓊脂粉的1/2MS培養基。

7.如權利要求1所述的一種十二卷類多肉植物的離體培養方法，其特征在于，第五步中所述煉苗培養的培養基質為泥炭和珍珠巖，泥炭與珍珠巖之間的質量比為1:1，其具體步驟為：將幼苗載入培養基質后澆足活棵水，用尼龍薄膜覆蓋防止幼苗失水萎焉，3天后揭去尼龍薄膜逐步煉苗。

8.如權利要求7所述的一種十二卷類多肉植物的離體培養方法，其特征在于，所述逐步煉苗的步驟為：在前7天內，每天葉面噴水2-3次，7天后早晚各噴一次，15天后用質量百分比濃度為0.1%的硝酸銨加質量百分比濃度為0.1%的磷酸二氫鉀追肥，葉面及根際施肥同時進行，15天后根據基枝含水量適當澆水，保持不干不澆，澆則澆透，3個月后，試管苗可以移栽至各種容器內作盆栽培育。