[發明專利]一種水產動物用復合酶制劑及其制備工藝

無效

• 申請號: 201110346657.X
• 申請日: 2011-11-07
• 公開（公告）號: CN102396652A
• 公開（公告）日: 2012-04-04
• 發明（設計）人: 王剛;劉麗;李冬梅
• 申請（專利權）人: 寶雞市星星協力生物有限公司
• 主分類號: A23K1/18
• 分類號: A23K1/18;A23K1/165
• 代理公司: 寶雞市新發明專利事務所 61106
• 代理人: 李鳳岐

技術領域

本發明屬于飼料添加劑技術領域，具體涉及一種水產動物用復合酶制劑及其制備工藝。

背景技術

魚、蝦類水產動物對蛋白質的需求較陸生動物高，蛋白質水平一般要求在25％～50％之間，所以水產飼料蛋白質含量都很高，而水產動物內源性蛋白酶往往不能充分利用蛋白質，加入外源性蛋白酶后，可彌補內源性蛋白酶的不足，提高蛋白質吸收率10％左右，在節約蛋白質同時減少對環境的污染。同時魚、蝦等水生動物的消化道與其它動物有較大區別，消化道較短，食物在消化道停留的時間短，消化吸收率差；而且眾多水生動物沒有胃，消化道pH在6.8～7.2之間，需要合適PH值的蛋白酶才能發揮水解蛋白質的作用，提高飼料消化利用率。另外，常規飼料原料如玉米、麥類、餅粕類等都存在一定量的抗營養因子，最多的就是非淀粉多糖，有的甚至占到了整個原料的四分之一，要分解這些抗營養因子，就必須依靠添加非淀粉多糖酶：如木聚糖酶、纖維素酶、甘露聚糖酶等。

由于水產動物消化系統的特殊性，水產飼料的加工需要采用定型和制粒工藝，但制粒過程中的高溫(一般為80℃)會造成大部分酶蛋白失活，活性下降50～80％，甚至無效果。所以，如何提高飼用水產復合酶的耐受溫度也是一個急需解決的問題。

發明內容

本發明解決的技術問題：提供一種水產動物用復合酶制劑及其制備工藝，以兩種菌株混合發酵技術制備水產動物飼用復合酶制劑，且采用該方法制備的水產動物飼用復合酶制劑，不但產酶能力增強，而且所產酶的耐高溫特性增強，可以耐受水產飼料生產時的調質溫度，提高水產動物對飼料養份的利用效率，尤其是蛋白質的利用率，減少氮、磷排泄量，降低水環境的污染，促進水產動物健康生產，提高水產養殖業的經濟效益和生態效益。

本發明采用的技術解決方案：

一種水產動物用復合酶制劑包含：中性蛋白酶酶活5000～7000u/g，甘露聚糖酶酶活2000～3000u/g，木聚糖酶酶活3000～4000u/g，纖維素酶酶活2000～3000u/g。

其中，

中性蛋白酶的作用機理：將大分子蛋白質水解為小分子肽或氨基酸等產物，以利于蛋白質的有效吸收和利用。

甘露聚糖酶的作用機理：將廣泛存在于豆類籽實中的甘露聚糖降解為甘露低聚糖，不僅消除了甘露聚糖對單胃動物的抗營養作用，同時生成的甘露低聚糖在動物腸道中起著重要的調節作用。

木聚糖酶的作用機理：可將木聚糖降解成低聚木糖和木糖，使木聚糖的黏性和持水性大大下降，從而消除木聚糖的抗營養作用。

纖維素酶的作用機理：將纖維素分解為葡萄糖，消除其抗營養作用，調節腸道菌群平衡，增強動物生產性能。

所述水產動物用復合酶制劑的制備工藝，包括下述步驟：

第一步：對產中性蛋白酶、纖維素酶的米曲霉菌種以及產木聚糖酶、甘露聚糖酶的黑曲霉菌種進行紫外線照射誘變，篩選出耐高溫高產菌株后保藏，并對保藏的菌種傳代；

第二步：將保藏的米曲霉菌種、黑曲霉菌種分別接種在麥芽汁瓊脂培養基斜面上，置于恒溫培養箱中，30℃培養76h-82h，待斜面長滿菌絲并長滿孢子后，加入適量的無菌水分別洗下孢子，制成米曲霉一級種子懸浮液和黑曲霉一級種子懸浮液；

第三步：取豆粕65～75wt％，麥麩20～30wt％，硫酸銨2～5wt％，磷酸二氫鉀1～1.5wt％混合均勻制成固體培養基料；

第四步：取適量固體培養基料裝入容器中，按料水重量比1∶1.0～1.3的比例加水混勻，121℃滅菌30min后冷卻制成固體培養基；然后按固體培養基料5～10wt％的比例在固體培養基上分別接種米曲霉一級種子懸浮液和黑曲霉一級種子懸浮液，置于恒溫培養箱中，30℃培養85～87h，待培養基表面長滿孢子后，加入適量的無菌水分別洗下孢子，制成米曲霉二級種子懸浮液和黑曲霉二級種子懸浮液；

第五步：取豆粕60～70wt％，麥麩20～30wt％，稻殼粉5～10wt％，硫酸銨2～3wt％，磷酸二氫鉀1～1.5wt％，硫酸鎂0.15～0.2wt％混合均勻制成發酵培養基料；

第六步：在發酵培養基料中按料水重量比2.5∶1的比例加水混勻，121℃滅菌30min后冷卻制成發酵培養基；然后按發酵培養基料15～20wt％的比例分別將米曲霉二級種子懸浮液和黑曲霉二級種子懸浮液均勻噴灑在發酵培養基中，攪拌均勻后裝入曲盤進行發酵，發酵溫度28～32℃，相對濕度75～80％，發酵時間84～96h；