[發(fā)明專利]一種調(diào)節(jié)脂代謝的蛋白及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110346572.1
• 申請日: 2011-11-04
• 公開（公告）號: CN103083668A
• 公開（公告）日: 2013-05-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 翟琦巍;劉洋
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院
• 主分類號: A61K45/00
• 分類號: A61K45/00;A61K48/00;C12Q1/48;A61P1/16;A61P3/06
• 代理公司: 上海專利商標事務(wù)所有限公司 31100
• 代理人: 陳靜

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物制藥；更具體地，本發(fā)明涉及一種調(diào)節(jié)脂代謝的蛋白及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic?fatty?liver?disease，NAFLD)會引起許多肝臟慢性疾病，如肝硬化、肝癌和肝臟衰竭(1-3)。NAFLD的發(fā)生與年齡，二型糖尿病和高血脂相關(guān)(4)。肝臟脂肪化是NAFLD的早期癥狀，它的發(fā)生也是和年齡、二型糖尿病和高血脂相關(guān)的(5，6)。小鼠隨著年齡增長或者在高脂食物喂養(yǎng)情況下都會發(fā)生肝臟脂肪化(7)。甘油三酯在肝臟中的過度積累會導(dǎo)致肝臟脂肪化，其中的機制包括：增加的脂肪攝入、增強的脂肪合成和脂肪氧化及肝臟脂肪向外輸出的減少(8)。

脂代謝能夠被許多轉(zhuǎn)錄后修飾所調(diào)控，如：磷酸化、泛素化和乙酰化(9，10)。蛋白的乙酰化修飾已經(jīng)成為調(diào)控細胞代謝的一種非常重要的轉(zhuǎn)綠后修飾(11)，同時乙酰化是一個動態(tài)的過程，這個過程受乙酰化酶和去乙酰化酶所調(diào)控。SIRT1是一個NAD+依賴的去乙酰化酶，在肝臟中敲除SIRT1會影響脂肪酸氧化造成肝臟脂肪化(12)。肝臟特異性敲除另一個去乙酰化酶SIRT6會增加糖原和甘油三酯的合成從而形成脂肪肝(13)。乙酰化酶也參與了許多的脂代謝過程。SREBP是脂代謝中關(guān)鍵的調(diào)控因子，有報導(dǎo)發(fā)現(xiàn)乙酰化酶p300能夠乙酰化SREBP從而增加它的穩(wěn)定性(14，15)。另外的報導(dǎo)發(fā)現(xiàn)，p300還可以乙酰化脂代謝的另一個關(guān)鍵的調(diào)控因子PPARγ(16)。乙酰化酶GCN5被報導(dǎo)能夠乙酰化PGC-1β從而抑制它的下游參與脂代謝的基因的表達(17)。乙酰化酶PCAF被發(fā)現(xiàn)能夠乙酰化并增強β-catenin的穩(wěn)定性(18)，而β-catenin可以影響脂代謝和肝臟中甘油三酯的濃度(19)。雖然一些乙酰化酶被發(fā)現(xiàn)參與脂代謝的調(diào)控，但參與肝臟脂代謝的乙酰化酶還需要更多的研究。

蛋白乙酰基轉(zhuǎn)移酶-1(Patt1)是本實驗室克隆并鑒定的一個新的乙酰化酶，它屬于GNAT(GCN5?related?N-acetyltransferase)family，同時Patt1在肝臟中是高表達的(20)。但是，以往它在肝臟中的作用還不清楚。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種調(diào)節(jié)脂代謝的蛋白及其應(yīng)用。

在本發(fā)明的第一方面，提供蛋白乙酰基轉(zhuǎn)移酶-1(Protein?acetyltransferase-1，Patt1)的下調(diào)劑的用途，用于制備改善肝臟脂代謝的組合物。

在一個優(yōu)選例中，所述的組合物還用于：緩解或治療脂肪肝，緩解年齡相關(guān)的肝臟脂肪化，降低體脂肪含量，增加瘦體重，增強葡萄糖耐受能力，降低肝臟脂肪含量，減少肝臟中年齡相關(guān)的甘油三酯含量，降低低密度脂蛋白-膽固醇含量，減弱肝細胞脂肪酸攝取能力，降低肝臟中CD36基因的表達，降低肝臟中PPARγ的表達，降低肝臟中ACL基因的表達，降低肝臟中FAS基因的表達，降低肝臟中ELOVL6基因的表達，上調(diào)ACC蛋白磷酸化水平，降低肝臟中ACC的活性，減弱體內(nèi)脂肪合成，上調(diào)CPT-1蛋白的表達和活性，提高肝臟ATP水平和/或提高脂肪酸氧化能力。

在另一優(yōu)選例中，所述的蛋白乙酰基轉(zhuǎn)移酶-1的下調(diào)劑選自(但不限于)：

特異性干擾蛋白乙酰基轉(zhuǎn)移酶-1的編碼基因表達的干擾分子；或

特異性與蛋白乙酰基轉(zhuǎn)移酶-1結(jié)合的結(jié)合分子(如能夠抑制蛋白乙酰基轉(zhuǎn)移酶-1活性的抗體或配體)。

在另一優(yōu)選例中，所述的干擾分子選自(但不限于)：反義核酸、小干擾RNA、dsRNA、微小RNA；或能表達或形成所述反義核酸、小干擾RNA、dsRNA、微小RNA的構(gòu)建物。

在另一優(yōu)選例中，所述的干擾分子是小干擾RNA(siRNA)，其序列具有18-22bp的序列長度，且能夠與蛋白乙酰基轉(zhuǎn)移酶-1的mRNA互補并導(dǎo)致蛋白乙酰基轉(zhuǎn)移酶-1的表達被下調(diào)。

在另一優(yōu)選例中，所述的干擾分子具有SEQ?ID?NO：1或SEQ?ID?NO：3所示的核苷酸序列。

在本發(fā)明的另一方面，提供一種用于改善肝臟脂代謝的小干擾RNA分子，所述的小干擾RNA分子是：

(a)具有SEQ?ID?NO：1或SEQ?ID?NO：3所示核苷酸序列的小干擾RNA分子；和/或

(b)核苷酸序列與SEQ?ID?NO：1或SEQ?ID?NO：3所示核苷酸序列互補的小干擾RNA分子。

在本發(fā)明的另一方面，提供一種用于改善肝臟脂代謝的組合物，所述的組合物含有：

(1)有效量的所述的小干擾RNA分子；和