[發(fā)明專利]一種同時(shí)提取馬尾松針葉總RNA和基因組DNA的方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110344210.9
• 申請(qǐng)日: 2011-11-04
• 公開（公告）號(hào): CN102363778A
• 公開（公告）日: 2012-02-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 季孔庶;王曉鋒;何衛(wèi)龍;夏詩寬
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京林業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N15/10
• 分類號(hào): C12N15/10
• 代理公司: 南京知識(shí)律師事務(wù)所 32207
• 代理人: 盧亞麗

1.同時(shí)提取馬尾松針葉總RNA和基因組DNA的方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）總RNA提取：液氮研磨馬尾松針葉，之后轉(zhuǎn)移到預(yù)熱的5ml?CTAB緩沖液中，該CTAB緩沖液含有2%CTAB、2%PVP、100mM?Tris-HCl(pH8.0)、25mM?EDTA、2M?NaCl、0.5g/L亞精胺，使用前加入2%β-巰基乙醇，水浴加熱，用的氯仿/異戊醇抽提兩次，LiCl沉淀，上清液轉(zhuǎn)移到新管，記為溶液1備用；沉淀用500μl?SDS緩沖液溶解，500μl氯仿/異戊醇抽提一次，乙醇沉淀，干燥后加水溶解，得總RNA；所述SDS緩沖液含有1.0M?NaCl、0.5%?SDS、10mM?Tris-HCl?(pH8.0)、1mM?EDTA(pH8.0)；所述氯仿與異戊醇的體積比為24：1；

（2）基因組DNA提取：用5ml異丙醇沉淀第（1）步中的溶液1，之后加入500μl?SDS緩沖液溶解沉淀，500μl氯仿/異戊醇抽提一次，乙醇沉淀，最后用70%酒精洗滌2次，干燥后加水溶解，得基因組DNA。