[發(fā)明專利]一種改進的大腸桿菌植酸酶HTP6M及其基因和應用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201110343131.6 | 申請日： | 2011-11-03 |
| 公開（公告）號： | CN102392002A | 公開（公告）日： | 2012-03-28 |
| 發(fā)明（設計）人： | 吳繼文;王海 | 申請（專利權）人： | 青島蔚藍生物集團有限公司;廣州優(yōu)尼科生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N9/16 | 分類號： | C12N9/16;C12N15/55;C12N15/63;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;A23K1/165;A23L1/305 |
| 代理公司： | 北京匯澤知識產(chǎn)權代理有限公司 11228 | 代理人： | 張瑾 |
| 地址： | 266061 山東省青*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 改進 大腸桿菌 植酸酶 htp6m 及其 基因 應用 | ||
1.一種優(yōu)化改良的耐高溫植酸酶，其通過氨基酸突變獲得，在80℃飼料制粒時，存留植酸酶酶活大于80％。
2.如權利要求1所述的耐高溫植酸酶，其中所述的氨基酸突變對應模型植酸酶APPA為第47位用F替代A，第92位用E替代G，第136位用H替代T，第159位用V替代N，第164位用R替代D，第237位用R替代G。
3.權利要求1所述的耐高溫植酸酶，，其氨基酸序列為SEQ?ID?NO：2所示。
4.一種優(yōu)化改良的耐高溫植酸酶的編碼基因，其具有如SEQ?ID?NO：1所示的核苷酸序列。
5.一種重組載體，其中含有權利要求3所述的耐高溫植酸酶編碼基因。
6.一種宿主，其被權利要求4所述的重組載體轉化。
7.一種提高植酸酶耐熱性的方法，該方法包括：在模型植酸酶或與模型植酸酶氨基酸序列同源性超過90％的植酸酶氨基酸序列引入氨基酸取代。
8.權利要求7所述的方法，其中所述的氨基酸取代位點對應APPA氨基酸序列位點為第47位，第92位，第136位，第159位，第164位，第237位，優(yōu)選為第47位用F替代A，第92位用E替代G，第136位用H替代T，第159位用V替代N，第164位用R替代D，第237位用R替代G。
9.權利要求7或8所述的方法，其中所述的氨基酸取代是通過基因突變實現(xiàn)的，基因突變包括但不限于定點突變、PCR致錯突變或DNA?shuffling和密碼子同義突變。
10.權利要求1至3中任一項所述的植酸酶HTP6M在飼料添加劑及食品添加劑中的應用。
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