[發明專利]一種N-(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成方法

無效

• 申請號: 201110342876.0
• 申請日: 2011-11-03
• 公開（公告）號: CN103087148A
• 公開（公告）日: 2013-05-08
• 發明（設計）人: 姚德勇;郝智慧;王艷玲
• 申請（專利權）人: 青島康地恩藥業股份有限公司
• 主分類號: C07K5/062
• 分類號: C07K5/062
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種丙氨酰谷氨酰胺二肽化合物的合成方法，尤其是N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成方法。

背景技術

酰胺氨基酸是機體內含量非常豐富的一種氨基酸，是機體多種組織代謝的參與體，具有許多重要的生理功能：能促進胃腸粘膜細胞增生，維持腸道的完整性；巨噬細胞的吞噬作用、淋巴細胞的增值及蛋白質的合成都必須依賴充足的谷氨酰胺。缺乏谷氨酰胺會引發多種疾病。動物在各種應激狀態下，對L-谷氨酰胺的需求量大大增加，因此，給機體補充L-谷氨酰胺是極為必要的。

但谷氨酰胺溶解度低且不穩定，加熱后會產生有毒的焦谷氨酸和氨，因此限制了谷氨酰胺的腸外應用。而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺不僅溶解度高，是同樣條件下游離谷氨酰胺的200倍，并且性質穩定。最重要的是能被機體快速有效地分解為丙氨酸和谷氨酰胺，滿足機體需要，而無任何副作用。

現有的L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成方法主要有以下幾種：

（1）以L-丙氨酸為原料，其氨基經保護生成叔丁氧羰基丙氨酸或芐氧羰基丙氨酸，接著與L-谷氨酰胺在堿性條件下生成Boc-Ala-Gln或Z-Ala-Gln,然后三氟乙酸脫保護得到目標化合物。其路線步驟多，較為繁瑣，因而收率低。

（2）以L-丙氨酸為原料，與光氣反應生成N-羧酸酐，然后與L-谷氨酰胺在水中反應，即得。該方法步驟少而簡單，但該反應中間環化物N-羧酸酐不穩定易分解，而且副產物難以除去，最終產品難以純化，所以收率低，另外，光氣為劇毒物質，對環境和人體危害大。利用N端保護的氨基酸與三苯基膦反應生成活性酯，再與谷氨酰胺反應，然后用無機酸酸化，脫去保護基即得產物，該方法成本較高。

（3）中國專利200510102315.公開了一種L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成方法。該方法包括在縮合劑存在下，在惰性溶劑中將D-2-鹵代丙酸和谷氨酰胺縮合、酸化得到D-2-鹵代谷氨酰胺；然后勇敢水進行氨解得到目標化合物。

發明內容

本發明克服了已有技術中存在的不足，而提供一種工藝條件溫和，反應成本低的L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成方法。

本發明采取以下方案：

一種N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成方法，其合成方法如下：

（1）?室溫下將L-谷氨酰胺加入到甲苯和水的溶液中，甲苯和水配比為2:1，再加入5N無機堿，使溶液PH值達到8~10；滴加D-α-氯丙酰氯和甲苯混合溶液，用無機堿控制體系PH值為9~11。反應溫度保持在0℃~5℃；滴加完畢后室溫攪拌1~2小時后，冷卻，靜置分出有幾層，攪拌下將氯化鈉加入剩余溶液中，滴加鹽酸調PH值為1~2，繼續攪拌20分鐘，停止攪拌，冷卻析出，過濾，干燥得N-(2)-D-氯丙酰-L-谷氨酰胺。

（2）?將N-(2)-D-氯丙酰-L-谷氨酰胺與30%氨水按重量1:10~1:30的比例投入反應釜中反應5~10小時，反應溫度為20℃~70℃、反應壓力為2Kg/cm2，反應結束后冷卻至室溫，減壓濃縮，將濃縮液移至結晶罐，滴加甲醇，滴加完畢后，繼續攪拌1小時，冷卻至10℃，放置2小時，過濾干燥得粗品。

（3）?將粗品投入到反應釜中，加入純化水溶解，后加入活性炭，過濾，濾液加入甲醇，攪拌，過濾得精制品。

所述步驟（1）中無機堿為氫氧化鈉溶液；

所述步驟（1）中L-谷氨酰胺與甲苯溶液的體積比為1：7~1：11；

所述步驟（2）中N-(2)-D-氯丙酰-L-谷氨酰胺與30%氨水重量比為1：10~1：30。

本發明工藝簡單，不涉及氨基保護，成本低，與光氣法相比，本發明毒性小，操作性高，有利于人們的身體健康和環境保護，更適合規模化生產。

具體實施方式

實施例

1.N(2)-D-α-氯丙酰-L-谷氨酰胺的合成

在反應釜中先加入300kg水，150kg甲苯，室溫下加入48.2kgL-谷氨酰胺，冰浴至0-5℃。攪拌下加入66kg5N?NaOH溶液至L-谷氨酰胺全溶。再緩慢加入42Kg的D-2-氯丙酰氯的90kg甲苯溶液，同時滴加74kg的5N?NaOH溶液維持反應液PH?10(滴加兩個小時)。滴加完畢后繼續冰浴在0-5℃保持1小時。分層除去甲苯。60kgNaCl室溫下加到水相。加入22kg濃HCl，調PH為2.5，加入晶種，攪拌半小時。加入8kg濃鹽酸調PH?1,靜止1小時。過濾，干燥得產物。熔點（分解溫度）148℃，?產率：85.3%。

2.N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成