[發(fā)明專利]一種利用解脂耶羅威亞酵母菌株生產(chǎn)赤蘚糖醇的工藝

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110329642.2
• 申請日: 2011-10-26
• 公開（公告）號: CN102352393A
• 公開（公告）日: 2012-02-15
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 邱學(xué)良;孫魯;杜瑞鋒;黃偉紅;李毅;姜希生
• 申請（專利權(quán)）人: 山東福田藥業(yè)有限公司
• 主分類號: C12P19/02
• 分類號: C12P19/02;C12R1/645
• 代理公司: 德州市天科專利商標(biāo)事務(wù)所 37210
• 代理人: 房成星

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于發(fā)酵工程技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一株赤蘚糖醇生產(chǎn)菌及用其生產(chǎn)赤蘚糖醇的工藝。

背景技術(shù)

隨著全球肥胖病人的不斷增加，人們對無熱量甜味劑的需求不斷增大。赤蘚糖醇作為一種零熱量、純天然的健康型甜味劑，在肥胖患者較多的歐美地區(qū)開始逐漸走俏。?

目前，我國生產(chǎn)赤蘚糖醇的企業(yè)主要是中食歌瑞和保齡寶兩家公司，他們均采用解脂假絲酵母發(fā)酵生產(chǎn)，菌種來自中國食品發(fā)酵工業(yè)研究院。根據(jù)中國食品發(fā)酵工業(yè)研究院的專利CN1932002（申請?zhí)枺?00510102929.6）介紹，該菌種的發(fā)酵時間為96小時左右，但是實施例中的發(fā)酵時間為120～132小時，發(fā)酵時間比較長。這樣會產(chǎn)生三個不利因素：第一，由于發(fā)酵需要不斷攪拌和鼓風(fēng)，時間長電耗會很高；第二，發(fā)酵時間越長越容易發(fā)生染菌現(xiàn)象，輕則轉(zhuǎn)化率降低，重則造成倒罐；第三，這么長的發(fā)酵時間，大大降低了設(shè)備的生產(chǎn)效率，生產(chǎn)設(shè)備投資會比較大。

關(guān)于赤蘚糖醇的分離提純，CN1932002提到的工藝為發(fā)酵液過濾、濃縮、結(jié)晶、脫色、除鹽、再次濃縮和結(jié)晶。這種重結(jié)晶工藝得到的產(chǎn)品純度較高可達99.7%以上，但是重結(jié)晶會使赤蘚糖醇的收率大大降低，即使再從余液中提取也會大大提高生產(chǎn)成本。CN101302551A（申請?zhí)枺?00810016810.0）介紹了一種赤蘚糖醇的提取工藝為：發(fā)酵液經(jīng)陶瓷膜過濾后再經(jīng)納濾膜過濾除雜，然后濃縮結(jié)晶、分離干燥。本工藝收率高，生產(chǎn)成本低，但是生產(chǎn)的產(chǎn)品會含有發(fā)酵異味，產(chǎn)品純度和透光度也偏低，不能滿足客戶的要求。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種利用解脂耶羅威亞酵母菌株生產(chǎn)赤蘚糖醇的工藝，以解決現(xiàn)有技術(shù)攪拌和鼓風(fēng)時間長、電耗高、易發(fā)生染菌、生產(chǎn)效率低、成本高等問題。

本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是利用自然界中篩選的解脂耶羅威亞酵母菌經(jīng)人工擴繁后生產(chǎn)生產(chǎn)赤蘚糖醇，所述解脂耶羅威亞酵母菌菌種培養(yǎng)及利用該菌種生產(chǎn)赤蘚糖醇的工藝步驟為：菌種制備→一、二級種子培養(yǎng)→發(fā)酵獲得發(fā)酵液→陶瓷膜過濾→納濾→蒸發(fā)濃縮→活性炭脫色→離子交換→真空結(jié)晶→助晶→離心→烘干→篩分→包裝。離心所得母液再經(jīng)納濾提純后可達到陶瓷膜濾液的標(biāo)準(zhǔn)，因此可混入陶瓷膜濾液進入下一工序，這樣大大提高了產(chǎn)品收率。其具體生產(chǎn)工藝步驟如下：

1、菌種的制備

將保藏于冰箱冷藏室的斜面菌種轉(zhuǎn)接至新鮮斜面中，然后放置在生化培養(yǎng)箱中28～31℃培養(yǎng)2～3天。

將培養(yǎng)的新鮮斜面種子轉(zhuǎn)接于7～8個新配制的茄形培養(yǎng)皿中，放置在生化培養(yǎng)箱中28～31℃培養(yǎng)2～3天，使菌種得到進一步放大培養(yǎng)。

制備約7L液體培養(yǎng)基，分裝至50～70個干凈的1L三角瓶中，每瓶100～140ml，滅菌后冷卻待用。

在接種瓶中制備好液體種子培養(yǎng)基，冷卻。

在超凈工作臺中向培養(yǎng)好的每個茄形培養(yǎng)皿中倒入60～70ml無菌水，并用接種環(huán)將斜面上的菌落刮下在無菌水中混勻。

按每個三角瓶接種10～15ml的量在超凈工作臺中進行接種。

接種完畢的三角瓶用8層無菌紗布封好口，放置在恒溫振蕩培養(yǎng)箱中28～32℃震蕩培養(yǎng)24h。

將培養(yǎng)好的菌種在超凈工作臺中混入滅菌的接種瓶中待用。

2、一級種子培養(yǎng)

將1m3的一級種子罐沖洗干凈，“三路進汽”進行空消。

按裝液量700L配好種子培養(yǎng)基。

先用夾套升溫至罐壓0.08～0.09mpa，再通過“三路進汽”將罐壓升至0.1～0.12mpa進行實消。

攪拌并用夾套降溫至30～32℃，將接種瓶中的液體菌種“火焰接種”至罐內(nèi)。

按30～50m3/h通入無菌空氣，保持溫度28～31℃，攪拌轉(zhuǎn)速150～250r/min，培養(yǎng)20～24h。

3、二級種子培養(yǎng)

對10m3的二級種子罐進行空消，方法同一級種子罐。

按裝液量7～8m3配好種子培養(yǎng)基。

先用盤管升溫至罐壓0.08～0.09mpa，再通過“三路進汽”將罐壓升至0.1～0.12mpa進行實消。

攪拌并用盤管降溫至30～31℃，注意保持罐壓不能為0mpa。

對移種管道進行蒸汽濕熱滅菌，并由10m3罐用壓縮空氣進行反吹，將管道溫度降至50～60℃左右。

通過壓縮空氣將一級種子罐中的液體種子移至二級種子罐。

按250～400m3/h通入無菌空氣，保持溫度28～31℃，攪拌轉(zhuǎn)速100～150r/min，培養(yǎng)12h。

4、發(fā)酵