[發明專利]一種利用解脂耶羅威亞酵母菌株生產赤蘚糖醇的工藝

無效

• 申請號: 201110329642.2
• 申請日: 2011-10-26
• 公開（公告）號: CN102352393A
• 公開（公告）日: 2012-02-15
• 發明（設計）人: 邱學良;孫魯;杜瑞鋒;黃偉紅;李毅;姜希生
• 申請（專利權）人: 山東福田藥業有限公司
• 主分類號: C12P19/02
• 分類號: C12P19/02;C12R1/645
• 代理公司: 德州市天科專利商標事務所 37210
• 代理人: 房成星

1.一種利用解脂耶羅威亞酵母菌株生產赤蘚糖醇的工藝，其特征是是利用自然界中篩選的解脂耶羅威亞酵母菌，經人工擴繁后生產赤蘚糖醇，所述解脂耶羅威亞酵母菌菌種培養及利用該菌種生產赤蘚糖醇的工藝步驟為：菌種制備→一、二級種子培養→發酵獲得發酵液→陶瓷膜過濾→納濾→蒸發濃縮→活性炭脫色→離子交換→真空結晶→助晶→離心→烘干→篩分→包裝；離心所得母液再經納濾提純后可達到陶瓷膜濾液的標準，因此可混入陶瓷膜濾液進入下一工序，這樣大大提高了產品收率；其具體生產工藝步驟如下：

?(1)菌種的制備

a）將保藏于冰箱冷藏室的斜面菌種轉接至新鮮斜面中，然后放置在生化培養箱中28～31℃培養2～3天；

b)將培養的新鮮斜面種子轉接于7～8個新配制的茄形培養皿中，放置在生化培養箱中28～31℃培養2～3天，使菌種得到進一步放大培養；

c）制備約7L液體培養基，分裝至50～70個干凈的1L三角瓶中，每瓶100～140ml，滅菌后冷卻待用；

d）在接種瓶中制備好液體種子培養基，冷卻；

e）在超凈工作臺中向培養好的每個茄形培養皿中倒入60～70ml無菌水，并用接種環將斜面上的菌落刮下在無菌水中混勻；

f）按每個三角瓶接種10～15ml的量在超凈工作臺中進行接種；

g）接種完畢的三角瓶用8層無菌紗布封好口，放置在恒溫振蕩培養箱中28～32℃震蕩培養24h；

h）將培養好的菌種在超凈工作臺中混入滅菌的接種瓶中待用；

(2)一級種子培養

a）將1m3的一級種子罐沖洗干凈，“三路進汽”進行空消；

b）按裝液量700L配好種子培養基；

c）先用夾套升溫至罐壓0.08～0.09mpa，再通過“三路進汽”將罐壓升至0.1～0.12mpa進行實消；

d）攪拌并用夾套降溫至30～32℃，將接種瓶中的液體菌種“火焰接種”至罐內；

（5）按30～50m3/h通入無菌空氣，保持溫度28～31℃，攪拌轉速150～250r/min，培養20～24h；

(3)二級種子培養

a）對10m3的二級種子罐進行空消，方法同一級種子罐；

b）按裝液量7～8m3配好種子培養基；

c）先用盤管升溫至罐壓0.08～0.09mpa，再通過“三路進汽”將罐壓升至0.1～0.12mpa進行實消；

d）攪拌并用盤管降溫至30～31℃，注意保持罐壓不能為0mpa；

e）對移種管道進行蒸汽濕熱滅菌，并由10m3罐用壓縮空氣進行反吹，將管道溫度降至50～60℃左右；

f）通過壓縮空氣將一級種子罐中的液體種子移至二級種子罐；

g）按250～400m3/h通入無菌空氣，保持溫度28～31℃，攪拌轉速100～150r/min，培養12h；

(4)發酵

a）對100m3發酵罐進行空消，方法同一級種子罐；

b）按裝液量70～80m3配好發酵培養基；

c）先用盤管升溫至罐壓0.08～0.09mpa，再通過“三路進汽”將罐壓升至0.1～0.12mpa進行實消；

d）對移種管道進行蒸汽濕熱滅菌，自然降溫至50～60℃左右；

e）通過壓縮空氣將二級種子罐中的液體種子移至發酵罐；

f）按1000～1500m3/h通入無菌空氣，保持溫度29～31℃，前40h攪拌轉速為90～100r/min，以后為70～80r/min，發酵60～70h，還原糖降至0.1%后停止發酵；

(5)陶瓷膜過濾

將發酵液用壓縮空氣排至陶瓷膜循環罐中，用陶瓷膜過濾，得到折光度為15%～18%、赤蘚糖醇純度為75%～92%澄清濾液；

(6)納濾

陶瓷膜濾液進一步通過納濾膜進一步去除膠體色素等雜質，以便于后續活性炭脫色及過濾；

納濾后折光度為10%～13%；

(7)三效濃縮

納濾后的料液經三效濃縮后折光度為30%～40%左右，由于濃縮，顏色稍變深；

?(8)活性炭脫色

三效濃縮后的料液按固形物加入0.5%～1%的糖類專用活性炭，70～80℃保溫1～2h，再經板框過濾，得到透光度95%以上的料液；

(9)離交

按陰——陽——陰的順序走離子交換柱，陰樹脂為南開D296樹脂，陽樹脂為南開001×7，通過離子交換進一步除鹽脫色，最終透光度為100%；

(10)真空結晶

離交后的料液進入真空結晶槽，當從視鏡中觀察到有微小晶粒出現時，加入晶種，保持溫度60～65℃進行結晶，當視鏡中的晶粒不再運動時關掉蒸汽，抽真空降溫，溫度降至40～48℃時將料膏打入助晶槽；

(11)助晶

晶粒在助晶槽中進一步生長，當物料無明顯液體存在，溫度降至10～35℃左右時，進入離心工序；

(12)離心

將料膏加入離心機中離心5～10min，取出晶體物料，通過直線振動篩進入流化床進行烘干；

(13)烘干

物料進入流化床后，熱風溫度調至60～70℃，調節冷風風量，保持出料溫度不高于35℃；

(14)篩分

晶體赤蘚糖醇從流化床出來后進入旋振篩進行篩分，可得到不同粒度的產品；

(15)成品包裝

根據客戶的要求，選擇對應的粒度和包裝規格對晶體赤蘚糖醇進行包裝，成品純度在99.5%以上，水分在0.16%左右。