[發明專利]一種產葡萄糖氧化酶的黑曲霉及其應用

有效

• 申請號: 201110329425.3
• 申請日: 2011-10-26
• 公開（公告）號: CN102382773A
• 公開（公告）日: 2012-03-21
• 發明（設計）人: 陳堅;顧磊;張娟;堵國成;沈伊娜;費麗杰;劉瑋
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12Q1/32;C12Q1/04;C12N9/04;C12R1/685
• 代理公司: 北京匯信合知識產權代理有限公司 11335
• 代理人: 王秀麗

1.一種黑曲霉，保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號：CCTCC?NO：M2011291，分類學命名：黑曲霉BBE11721(Aspergillus?niger?BBE11721)。

2.一種權利要求1所述黑曲霉的篩選方法，其特征在于，具體步驟如下：

1)定性篩選：采用Fiedure.K.J顯色法，將分離出黑曲霉菌株點種于平板分離培養基，28℃培養3～4d后直至出現藍色顏色圈，進行藍色圈大小定性比對；

2)定量篩選：將黑曲霉菌絲體破壁上清液中加入2.5mL鄰聯茴香胺溶液，0.3mL的18％葡萄糖，0.1mL的90U?mL^-1辣根過氧化物酶，35℃保溫2min后，向試管中加入稀釋好的酶液樣品0.1mL，反應3min后，加入2mol?L^-1硫酸終止反應，取出試管，測OD540的吸光值，以熱失活的酶液做空白對照，根據標準曲線的結果，計算葡萄糖氧化酶活力單位。

3.權利要求1所述黑曲霉在葡萄糖氧化酶發酵生產中的應用。

4.根據權利要求3所述方法，其特征在于，發酵培養基組成如下：葡萄糖80g?L^-1，蛋白胨3g?L^-1，磷酸二氫鉀2g?L^-1，七水合硫酸鎂0.7gL^-1，氯化鉀0.5g?L^-1，硝酸鈉4g?L^-1，碳酸鈣3.5g?L^-1，pH自然。