[發(fā)明專利]一種復(fù)合菌無抗發(fā)酵飼料及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110329236.6
• 申請日: 2011-10-26
• 公開（公告）號(hào): CN102499321A
• 公開（公告）日: 2012-06-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 胡婷;彭子欣;王安如;劉瀅;劉婷
• 申請（專利權(quán)）人: 北京大北農(nóng)科技集團(tuán)股份有限公司;內(nèi)蒙古四季春飼料有限公司;哈爾濱大北農(nóng)牧業(yè)科技有限公司
• 主分類號(hào): A23K1/14
• 分類號(hào): A23K1/14;C12N1/20;C12N1/18;C12R1/125;C12R1/23;C12R1/865
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1.一種復(fù)合菌無抗發(fā)酵飼料，其特征在于：它由復(fù)合菌的菌液與配合飼料的干基質(zhì)混合、發(fā)酵，發(fā)酵完成后添加4％的預(yù)混料而制成；所述的復(fù)合菌由枯草芽孢桿菌(Bacillus?subtilis)CGMCC?No.4628、嗜酸乳桿菌(Lactobacillus?acidophilus)CGMCC?No.5093和釀酒酵母(Saccharomyces?cerevisiae)CGMCC?No.2388組成，上述三種菌在復(fù)合菌的菌液中的配比為1∶1∶1；所述的配合飼料的干基質(zhì)由以下重量百分比的成分組成：豆粕51.81％，玉米蛋白粉22.02％，菜籽粕3.89％，花生粕3.89％，磷酸氫鈣5.18％，食鹽2.98％，賴氨酸1.68％，氯化膽堿0.13％。

2.如權(quán)1所述的復(fù)合菌無抗發(fā)酵飼料，其特征在于：所述的復(fù)合菌的菌液中枯草芽孢桿菌的濃度為4.20-5.45log?CFU/mL；嗜酸乳桿菌的濃度為4.12-5.03log?CFU/mL；釀酒酵母的濃度為4.23-5.74log?CFU/mL；所述的4％預(yù)混料的組成及配比如下，每千克含：銅，30000mg；鐵，19000mg；鋅，18000mg；錳，9600mg；碘，80mg；硒，70mg；維生素A，800000IU；維生素D3，240000IU；維生素E，2400IU；維生素K3，480mg；維生素B1，150mg；維生素B2，480mg；維生素B6，240mg；維生素B12，1.6mg；煙酸，3100mg；泛酸，1900mg；葉酸，100mg；生物素，6mg；氯化膽堿，40000mg。

3.如權(quán)1所述的復(fù)合菌無抗發(fā)酵飼料，其特征在于：發(fā)酵的條件如下：復(fù)合菌的菌液在干基質(zhì)中的接種量為3-6％(v/w)；蛋白酶添加量為100-120U/g；料水比按重量體積比為1∶1-1∶0.4；溫度，35-40℃；發(fā)酵時(shí)間，96-168h。

4.如權(quán)3所述的復(fù)合菌無抗發(fā)酵飼料，其特征在于：發(fā)酵的條件如下：復(fù)合菌的菌液在干基質(zhì)中的接種量為4％(v/w)；蛋白酶添加量為110U/g；料水比為1∶0.6(w/v)；發(fā)酵溫度為35℃；發(fā)酵時(shí)間為168h。

5.如權(quán)1-4任一項(xiàng)所述的復(fù)合菌無抗發(fā)酵飼料的制備方法，其特征在于：包括如下步驟：

1)枯草芽孢桿菌菌液的制備：

枯草芽孢桿菌種子液的制備：將保藏菌種接種至裝有100ml?MNB培養(yǎng)基的錐形瓶中，30℃恒溫?fù)u床中培養(yǎng)16h，搖床轉(zhuǎn)速為225rpm；將制備好的枯草芽孢桿菌種子液按照1-3％的接種量接種至裝有100mL?MNB培養(yǎng)基的錐形瓶中，30℃恒溫?fù)u床中培養(yǎng)16h，搖床轉(zhuǎn)速為225rpm；

所述的MNB培養(yǎng)基配方如下：葡萄糖，5.0g/L；蛋白胨，5.0g/L；牛肉膏，3.0g/L；酵母浸粉，1.0g/L；七水硫酸鎂，0.5g/L；硫酸錳，0.005g/L；pH?7.0±0.2；

2)嗜酸乳桿菌菌液的制備：

嗜酸乳桿菌種子液的制備：將保藏菌種接種至裝有20ml?MRS的厭氧管中，37℃恒溫厭氧培養(yǎng)20h；將制備好的嗜酸乳桿菌種子液按照1-3％的接種量接種至裝有20mL?MRS培養(yǎng)基的厭氧管中，37℃恒溫厭氧培養(yǎng)20h；

所述的MRS培養(yǎng)基配方如下：蛋白胨，10.0g/L；牛肉膏，8.0g/L；酵母膏，4.0g/L；葡萄糖，20.0g/L；吐溫80，1mL/L；磷酸氫二鉀，2.0g/L；三水乙酸鈉，5.0g/L；檸檬酸三銨，2.0g/L；七水硫酸鎂，0.2g/L；硫酸錳，0.05g/L；pH?6.2±0.2；

3)釀酒酵母菌液的制備：

釀酒酵母種子液的制備：將保藏菌種接種至裝有100ml?YPD培養(yǎng)基的錐形瓶中，30℃恒溫?fù)u床中培養(yǎng)16h，搖床轉(zhuǎn)速為250rpm；

釀酒酵母菌液的制備：將制備好的釀酒酵母菌種子液按照1-3％的接種量接種至裝有100ml?YPD培養(yǎng)基的錐形瓶中，30℃恒溫?fù)u床中培養(yǎng)16h，搖床轉(zhuǎn)速為250rpm；

所述YPD液體培養(yǎng)基配方如下：酵母粉，5.0g/L；蛋白胨，10.0g/L；葡萄糖，20.0g/L；丙酸鈉，2.5g/L；pH?4.0±0.1；

4)發(fā)酵飼料的干基質(zhì)的配制：按配比稱取各成分、均勻攪拌；

5)復(fù)合菌的菌液的配制：按配比量取枯草芽孢桿菌菌液、嗜酸乳桿菌菌液、釀酒酵母菌液，混勻；

6)發(fā)酵：將復(fù)合菌的菌液接種于干基質(zhì)中，混勻，按所述發(fā)酵條件發(fā)酵；

7)向步驟6)發(fā)酵產(chǎn)物中加入4％預(yù)混料混勻，即得復(fù)合菌無抗發(fā)酵飼料。