[發明專利]日本血吸蟲重要抗原的高通量篩選及其在血吸蟲病診斷中的應用

有效

• 申請號: 201110322599.7
• 申請日: 2011-10-21
• 公開（公告）號: CN103059117A
• 公開（公告）日: 2013-04-24
• 發明（設計）人: 潘衛慶;徐新東
• 申請（專利權）人: 同濟大學
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;G01N33/68;C12N15/12;C12N15/63;C12N1/21;C12N1/15;C12N1/19;C12N5/10;C12P21/02;C07K16/18;C07K1/14
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 祝蓮君;雷芳

1.一種血吸蟲陽性抗原，其特征在于，所述抗原選自：

(a)氨基酸序列如SEQ?ID?NO：1-24所示的多肽：

(b)將SEQ?ID?NO：1-24氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基取代、缺失或添加而形成的具有免疫原性的衍生多肽；

(c)與SEQ?ID?NO：1-24所示氨基酸序列的同源性≥90％的、具有免疫原性的多肽；或

(d)具有免疫原性的多肽(a)-(c)的片段。

2.如權利要求1所述的陽性抗原，其特征在于，所述抗原的氨基酸序列如SEQ?ID?NO：1-8所示。

3.權利要求1所述陽性抗原的用途，其特征在于，所述抗原用于制備檢測血吸蟲的試劑或試劑盒。

4.一種分離的多核苷酸，其特征在于，包括一核苷酸序列，所述核苷酸序列選自下組：

(a)編碼如權利要求1所述陽性抗原的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸。

5.如權利要求4所述的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸編碼具有SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的抗原。

6.一種載體，其特征在于，該載體含有權利要求4所述的多核苷酸。

7.一種遺傳工程化的宿主細胞，其特征在于，它含有權利要求6所述的載體或染色體整合有權利要求4所述的多核苷酸。

8.一種血吸蟲陽性抗原的制備方法，其特征在于，所述方法包括步驟：

(a)在適合表達的條件下，培養權利要求7所述的宿主細胞；

(b)從培養物中分離出血吸蟲陽性蛋白抗原。

9.一種檢測血吸蟲的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括：容器或載體；以及位于所述容器內或載體上的如權利要求1所述的陽性抗原。

10.一種檢測血吸蟲的試劑，其特征在于，所述試劑包括：固相載體以及包被于所述固相載體上的權利要求1所述陽性抗原。

11.一種能與權利要求1所述的血吸蟲陽性抗原特異性結合的抗體。

12.一種抗原-抗體復合物，其特征在于，所述的復合物包括：

(i)氨基酸序列如SEQ?ID?NO：1-8所示的陽性抗原；

(ii)與(i)陽性抗原特異性結合的抗體；

并且所述的抗原和抗體結合在一起。

13.如權利要求12所述的復合物，其特征在于，所述復合物由氨基酸序列如SEQ?ID?NO：1所示的陽性抗原及其特異性結合的抗體所構成。

14.權利要求12所述的抗原-抗體復合物的用途，其特征在于，所述復合物用于：

(a)制備檢測血吸蟲的試劑或試劑盒；和

(b)用作檢測血吸蟲的陽性對照。

15.一種高通量篩選血吸蟲抗原的方法，其特征在于，包括步驟：

(1)將含有信號肽的候選蛋白抗原與標志蛋白GST進行融合表達；

(2)將步驟(1)得到的融合蛋白置于螯合了GSH的多孔板的孔中，從而捕獲GST融合蛋白；

(3)將含有血吸蟲抗體的血清置于步驟(2)的多孔板的孔中；

(4)篩選形成特異性抗原-抗體復合物的孔，所對應的候選蛋白即為血吸蟲陽性抗原。