[發明專利]新生兒ABO/Rh血型鑒定試劑卡及其制備方法

有效

• 申請號: 201110322294.6
• 申請日: 2011-10-21
• 公開（公告）號: CN102507961A
• 公開（公告）日: 2012-06-20
• 發明（設計）人: 朱曉霞;王惠民;施秀英
• 申請（專利權）人: 江蘇中盛醫學診斷試劑有限公司
• 主分類號: G01N33/80
• 分類號: G01N33/80
• 代理公司: 南通市永通專利事務所 32100
• 代理人: 葛雷

技術領域

本發明涉及一種新生兒血型定型及其應用。更具體的說，本發明涉及一種ABO/Rh血型定型試劑卡的組成、制備方法及其應用，涉及新生兒溶血病的早期診斷和輸血醫學領域。

背景技術

新生兒溶血病(簡稱HDN)是發生在胎兒和早期新生兒的一種免疫性溶血性疾病。該病由母嬰血型不配合引起。當胎兒由父體遺傳獲得的顯性抗原恰為母體缺乏時，此抗原在妊娠時通過胎盤進入母體，刺激母體產生相應的免疫抗體，此抗體可因再次懷孕得到刺激而加強。母體內存在的與胎兒抗原相對應的免疫性抗體可通過胎盤進入胎兒體內，與胎兒紅細胞上相應抗原結合，導致胎兒紅細胞破壞，引起死胎、流產或早產。出生后表現為貧血、黃疸，嚴重會導致心力衰竭及核黃疸甚至死亡。有資料表明中國有30％妊娠存在血型不合，新生兒溶血病的發病率為11.9％。

由免疫產生的血型抗體多數為IgG抗體，而天然存在的血型抗體多數為IgM抗體。大量的免疫血液學實驗證明，只有分子量較小的IgG免疫抗體能通過胎盤進入胎兒體內引起新生兒溶血病。因此新生兒溶血病可以發生在所有能免疫產生IgG抗體的血型系統，但主要發生在ABO及Rh系統，其中ABO系統的新生兒溶血病病情一般較輕，Rh系統的新生兒溶血病病情較嚴重，其他血型系統不合溶血病如Kidd、MN、Duffy等也有報道，但極少見。抗P1、抗Lea、Leb等屬IgM性質，不能通過胎盤，故不會產生HDN。

新生兒溶血病是新生兒期的常見病之一，如及早診斷治療，治愈率較高，比較少遺留神經系統后遺癥，未及時診斷治療者，可發生嚴重并發癥核黃疸則會遺留智力低下、聽覺障礙、抽搐等神經系統后遺癥。故及早診斷、治療是本病的關鍵。因此，對新生兒溶血病作產后早期診斷以便及時采取預防措施是很重要的。要做到胎兒早期診斷就必須對新生兒作正確的免疫學分析及血型血清學檢查。

新生兒由于出生時ABO抗原還沒發育完全，直到18個月后才充分發育，而Rh血型抗原在出生時一般已形成。新生兒出生時，除少數有微量的IgM抗體外，尚未形成自己的IgG、IgA和IgE，大部分嬰兒要在出生幾個月以后形成血型抗體。所以新生兒ABO血型檢測以正定型為主，與成人相比，抗原、抗體表達弱，存在漏檢的風險，容易造成血型鑒定和交叉配血困難。正確的血型鑒定與選擇高靈敏度交叉配血方法是保證新生兒安全輸血前提和保障。有助于新生兒溶血病的及時確診和治療。傳統的血型鑒定、交叉配血的方法也就是撥片法、鹽水配血法，操作煩瑣、易漏檢、錯檢，不能包成檢測結果的正確，嚴重危害了受血者的生命安全。然而，目前國內尚無任何新生兒溶血病檢測的試劑盒銷售，各地醫院及血液中心的檢測方法五花八門，不能準確鑒定能引起新生兒溶血病的抗體實際情況。

在國內外，有些產家生產用于ABO血型定型和Rh定型的ABO/Rh血型定型檢測試劑卡，但其采用的凝膠為葡聚糖凝膠，此凝膠顆粒的直徑大約在20-50微米。此外，已有的卡僅進行僅進行RhIgM抗體的檢測，不進行Rh?IgG抗體的測定，降低了ABO/Rh血型定型的準確性，容易導致ABO/Rh血型的錯誤。

發明內容

本發明點目的在于提供一種靈敏度高、特異性強、穩定性好的新生兒ABO/Rh血型鑒定試劑卡及其制備方法。

本發明的技術解決方案是：

一種新生兒ABO/Rh血型鑒定試劑卡，其特征是：具有8個微柱凝膠管，分別是：一管為含有IgM性質的單克隆抗A抗體的凝膠管、一管為含有IgM性質的單克隆抗B抗體的凝膠管、一管為含有IgM性質的單克隆抗AB抗體的凝膠管、一管為含有IgM性質的單克隆抗D抗體的凝膠管、一管為含有IgM性質和IgG性質的單克隆抗D抗體的凝膠管、一管為用于陰性對照的含有凝膠懸浮介質的凝膠管、一管為含有抗IgG試劑的凝膠管和一管為含有抗IgG試劑及抗C3d試劑的凝膠管。

一種新生兒ABO/Rh血型鑒定試劑卡的制備方法，其特征是：包括下列步驟：

1)凝膠懸浮緩沖液的配制

所述緩沖液配方如下：

20mL的0.15M磷酸鹽緩沖液

氯化鈉????????????????????????1.75g

甘氨酸????????????????????????18g

其中20mL的0.15M磷酸鹽緩沖液是由11.3mL的0.15MKH₂PO₄和8.7mL的0.15M?Na₂HPO₄組成；

以上試劑用800毫升蒸餾水溶解，用1M氫氧化鈉調節pH至6.7，最后定容至一升；