[發明專利]ABO-CDE血型鑒定試劑卡及其制備方法

無效

• 申請號: 201110321956.8
• 申請日: 2011-10-21
• 公開（公告）號: CN102331504A
• 公開（公告）日: 2012-01-25
• 發明（設計）人: 朱曉霞;王惠民;施秀英
• 申請（專利權）人: 江蘇中盛醫學診斷試劑有限公司
• 主分類號: G01N33/80
• 分類號: G01N33/80
• 代理公司: 南通市永通專利事務所 32100
• 代理人: 葛雷

技術領域

本發明涉及一種血型定型卡的制備及其應用。更具體的說，本發明涉及一種ABO-CDE血型定型試劑卡的組成、制備方法及其應用，涉及輸血醫學領域。

背景技術

ABO血型系統和Rh血型系統是人類最為重要的兩個血型系統，高度的免疫原性使它們具有重要的臨床意義，尤其是與臨床急救輸血、器官移植等關系較為密切。因此，開展ABO血型及Rh血型抗體的研究對臨床血型鑒定、血型理論研究及應用血型抗體預防和治療新生兒溶血病等具有重要意義。

自1900年發現ABO血型以來，Hoktoen1907年先提出了血型鑒定在輸血治療中的重要性。Ottenberg等再1908年進一步提出了交叉配血實驗的概念，強調了血型鑒定對臨床輸血的深遠意義。輸血是臨床搶救病人生命的重要醫療手段之一，正確鑒定血型是安全輸血的首要步驟，ABO血型不相容在臨床輸血中會導致嚴重的即發性溶血性輸血反應，危及患者生命。因此，ABO血型的準確定型至關重要，是安全輸血的基礎和保障。

Levine等于1939年發現了人類的Rh血型，之后證明該血型是僅次于ABO血型的重要血型，也是紅細胞系統中最為復雜的一個系統，目前國際輸血協會(ISBT)已確認Rh血型抗原有49個。Rh血型系統的5種主要抗原為D、C、E、c、e抗原，其中抗原D抗原性最強。紅細胞表面含有Rh陽性抗原，紅細胞表面不含有Rh陰性抗原，當Rh陰性患者接受Rh陽性血液后，至少有20％患者會對Rh抗原發生免疫應答，在第二次或多次輸入Rh陽性血液時即可發生溶血反應。

另外，Rh陰性妊娠婦女在孕育Rh陽性胎兒或孕前接受過Rh陽性的血液，可產生Rh抗體，Rh抗體主要是不完全抗體IgG，分子能透過胎盤。若再次妊娠的胎兒為Rh陽性時，此抗體通過胎盤鍵入胎兒體內，與相應的Rh陽性紅細胞發生反應，可能發生新生兒溶血病。

2000年衛生部頒發的《臨床輸血技術規范》(衛醫法[2000]184號)第四章第十五條明確規定：“輸血科(血庫)要逐項核對輸血申請單、受血者和供血者血樣，復查受血者和供血者ABO血型(正反定型)。并常規檢查患者的Rh血型，正確無誤時可進行交叉配血。

在國內外，有些產家已采用的凝膠為葡聚糖凝膠，此凝膠顆粒的直徑大約在20-50微米，生產了用于ABO血型定型和Rh系列定型的ABO/Rh血型定型檢測試劑卡，但已有的卡僅進行ABO正定型，不進行ABO反定型，降低了ABO血型定型的準確性，容易導致ABO血型的錯誤。此外，已有的ABO/Rh血型檢測卡僅進行D(Rh1)的鑒定，但沒有Rh(Rh2、Rh3)系列的定型。

發明內容

本發明的目的在于提供一種使用方便、靈敏度高、準確性好的ABO-CDE血型鑒定試劑卡及其制備方法。

本發明的技術解決方案是：

一種ABO-CDE血型鑒定試劑卡，其特征是：試劑卡上具有8個微柱凝膠管，分別是：一管為含有IgM性質的單克隆抗A抗體的凝膠管、一管為含有IgM性質的單克隆抗B抗體的凝膠管、一管為含有IgM性質的單克隆抗D抗體的凝膠管、一管為含有IgM性質的單克隆抗C抗體的凝膠管、一管為含有IgM性質的單克隆抗E抗體的凝膠管、一管為用于陰性對照的含有凝膠緩沖液的凝膠管、兩管為用于反定型含有凝膠緩沖液的凝膠管。

一種ABO-CDE血型鑒定試劑卡的制備方法，其特征是：包括下列步驟：

1)凝膠緩沖液的配制

所述緩沖液配方如下：

20mL的0.15M磷酸鹽緩沖液

氯化鈉????????1.75g

甘氨酸????????18g

其中20mL的0.15M磷酸鹽緩沖液由11.3mL的0.15M?KH₂PO₄和8.7mL的0.15M?Na₂HPO₄組成；

以上試劑用800毫升蒸餾水溶解，用1M氫氧化鈉調節pH至6.7，最后定容至1升；再添加0.6g對羥基苯甲酸甲酯和0.13g對羥基苯甲酸丙酯，添加牛血清白蛋白，添加量為使牛血清白蛋白的終濃度為3％；得到凝膠懸浮緩沖液；

2)凝膠的準備

選用顆粒大小為20-50微米的葡聚糖凝膠，用步驟1)配制的凝膠緩沖液充分浸泡后再用該緩沖液洗滌3-5次，除去凝膠破損碎片，收集得到顆粒大小均勻完整呈球形的凝膠；

3)抗體的選擇

選擇IgM性質的單克隆抗A抗體，效價≥128

選擇IgM性質的單克隆抗B抗體，效價≥128