[發(fā)明專利]β-葡聚糖GFPBW1及其制備方法和用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110321162.1
• 申請日: 2011-10-20
• 公開（公告）號: CN103059160A
• 公開（公告）日: 2013-04-24
• 發(fā)明（設計）人: 丁侃;王瀅;方建平;董群
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學院上海藥物研究所
• 主分類號: C08B37/02
• 分類號: C08B37/02;A61K31/716;A61P35/00;A61P35/02;A61P35/04
• 代理公司: 北京金信立方知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11225
• 代理人: 朱梅;徐琳

1.一種具有如下所示的結(jié)構(gòu)式的β-葡聚糖GFPBW1：

其中，n表示150～750的整數(shù)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的GFPBW1，其特征在于，所述β-葡聚糖GFPBW1的平均分子量為3×10⁵Da，分子量范圍為1～5×10⁵Da。

3.一種制備如權(quán)利要求1所述的β-葡聚糖GFPBW1的方法，包括如下步驟：

(a)用醇溶液浸泡干燥的灰樹花子實體，離心，固體物晾干，然后用沸水提取，所得固體殘渣用堿溶液浸泡，離心將殘渣丟棄，收集上清；調(diào)pH至7，再進行透析、濃縮，隨后用醇溶液進行沉淀，離心收集沉淀，再經(jīng)無水乙醇和丙酮依次洗滌，干燥后得棕黃色固體GFPB粗產(chǎn)物；

(b)用適量蒸餾水溶解步驟(a)所得GFPB粗產(chǎn)物，離心除去不溶物，收集上清液并進行DEAE-纖維素柱層析，然后將得到的洗脫組分進行濃縮、透析和干燥以得到β-葡聚糖GFPBW1。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，步驟(a)中所述的醇溶液為95％乙醇，優(yōu)選地用醇溶液浸泡為用95％乙醇浸泡灰樹花子實體兩周，每周更換乙醇一次。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，步驟(a)中所述的沸水提取的條件為：每次加約2倍體積蒸餾水，提取時間為4～6小時，并用苯酚-硫酸法檢測提取液中糖含量，提取3～5次，優(yōu)選提取4次。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，步驟(a)中所述的堿溶液浸泡的條件為：于4℃下用5％NaOH溶液浸泡兩次，每次4小時。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，步驟(a)中所述的透析條件為：采用對流動水透析2天。

8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，步驟(b)中所述DEAE-纖維素柱層析的條件為：先以蒸餾水做洗脫液，然后分別用0.1、0.2、0.3mol/L的氯化鈉溶液進行洗脫，再將蒸餾水洗脫部分的組分進行濃縮、透析和冷凍干燥以得到GFPBW1。

9.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(a)取干燥的灰樹花子實體，用3倍體積的95％的乙醇浸泡脫脂，每7天為一周期，更換兩次，浸泡完畢，離心，將所得固體物置于室溫通風處晾干；然后進行提取，3kg原材料每次加30L自來水加熱煮沸，提取時間為4～6小時，并用苯酚-硫酸法檢測提取液中糖含量，至糖反應不明顯，共計提取4次；沸水提取后的固體殘渣于4℃下用5％NaOH浸泡兩次，每次4小時，合并離心，將殘渣丟棄，收集上清；用約2mol/L?HCl中和至PH約7，出現(xiàn)渾濁，對流動水透析2天，濃縮，加入3倍體積的95％的乙醇進行沉淀，8000rpm離心收集沉淀，經(jīng)無水乙醇和丙酮依次洗滌后，于40℃真空干燥，得棕黃色固體GFPB粗產(chǎn)物；

(b)取上述GFPB，加入適量蒸餾水溶解，離心除去不溶物，收集上清液并進行DEAE-纖維素柱層析，其中先以蒸餾水作為洗脫液，然后分別用0.1、0.2和0.3mol/L的氯化鈉溶液洗脫，分別收取合并各流分，蒸餾水洗脫部分的組分進行濃縮、透析和冷凍干燥后得到GFPBW1。

10.一種藥物組合物，其包含有效劑量范圍的權(quán)利要求1所述的β-葡聚糖GFPBW1作為有效成分，并且優(yōu)選地進一步含有藥學上可接受的載體及輔料。

11.權(quán)利要求1所述的β-葡聚糖GFPBW1在制備用于治療腫瘤的藥物中的用途。

12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的用途，其中所述腫瘤包括組織系統(tǒng)的實體瘤、血液系統(tǒng)癌癥、各種原發(fā)或繼發(fā)性惡性腫瘤以及惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移。