[發明專利]一種高純度四氫葉酸的制備方法

有效

• 申請號: 201110319838.3
• 申請日: 2011-10-20
• 公開（公告）號: CN102329318A
• 公開（公告）日: 2012-01-25
• 發明（設計）人: 吳范宏;胡云莉;吳建越;朱勇剛
• 申請（專利權）人: 浙江圣達藥業有限公司;上海應用技術學院
• 主分類號: C07D475/04
• 分類號: C07D475/04
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 吳寶根

技術領域

本發明涉及一種高純度四氫葉酸的制備方法，具體的說是使用緩沖溶液作為反應液從而控制反應的pH值，采用分批加料的方式，在常溫常壓下使用還原劑還原反應，葉酸基本反應完全，高收率地得到高純度的四氫葉酸。

背景技術

四氫葉酸：Tetrahydrofolic?Acid，5,6,7,8-tetrahydropreroyl-L-glutamicacid，化學名稱：?N-4-[(2-氨基-4-氧代-1,4,5,6,7,8-六氫-6-喋啶)甲胺基]苯甲酰基-L-谷氨酸；CAS?NO.?135-16-0；分子式：C₁₉H₂₃N₇O₆；分子量：445.40；其結構式如下：

四氫葉酸作為一種重要的醫藥中間體，被廣泛的用于生物、化工、制藥、生化研究等領域，具有十分重要的生物生理作用，它主要用于合成(5)-甲酰基四氫葉酸及其鹽（甲酰四氫葉酸）或(5)-甲基四氫葉酸及其鹽，是一碳單元的轉運和代謝的輔酶?(enzyme?cofactor)，在體內參與嘧啶、嘌呤、絲氨酸、甘氨酸等的合成和代謝；四氫葉酸及其衍生物是葉酸在生物體內的主要作用形式，可用于治療由于缺乏葉酸引起的巨紅細胞性貧血；作為解毒劑(antifolate?rescue)用于增強葉酸拮抗劑的相容性，特別是用于增強治療癌癥的氨碟呤和甲胺碟呤的相容性；用于增強氟化嘧啶的治療效果；用于治療例如牛皮癬和風濕性關節炎的自身免疫疾病；用于增強某些抗寄生蟲藥劑例如三加氧芐二氨嘧啶-磺胺甲基異惡唑的相容性；用于降低在化學療法中二脫氫氨四氫葉酸(dideazatetrahydrofolates)的毒性。同時，四氫葉酸是利用絲氨酸羥甲基轉移酶酶法生產L-絲氨酸的重要原料。

(5)-甲基四氫葉酸鈣作為四氫葉酸的一種衍生物被廣泛的應用，但是它質量標準要求很高，如果采用純度不高的四氫葉酸進行合成，那么合成的(5)-甲基四氫葉酸即使進行多次的純化也很難得到符合要求的(5)-甲基四氫葉酸。如果使用較純的四氫葉酸，那么就能夠很容易地合成純度很高的(5)-甲基四氫葉酸。所以純度較高的四氫葉酸是合成(5)-甲基四氫葉酸及其鹽的關鍵。其他四氫葉酸衍生物的合成也遇到了同樣的問題。所以人們長期以來一直在致力于尋找一種適合工業化大量生產高純度四氫葉酸的方法。

目前四氫葉酸主要是由葉酸還原得到的，經常用到的方法有：化學還原法、二氫葉酸還原酶法、催化加氫法等。

催化加氫法又分為常壓催化加氫法和加壓催化加氫法，是早期制備四氫葉酸的一種主要方法，但是它存在很多缺點。1.?催化劑用量較大：專利(US4665176)中提到的還原葉酸需要使用金屬催化劑，其中鉑-碳，銠-碳催化劑的效果不是很理想，而使用氧化鉑做催化劑時需要活化且危險，所有的催化劑的用量均很大。2.反應時間較長：專利(US4665176及US3983118)均需要催化氫化8-24h，專利(US20090198055)中還提到，在還原溫度在0-5℃時，反應時間更是需要74h。3.?合成的四氫葉酸收率純度均較低：根據專利(US4665176)提到四氫葉酸收率在75%左右，所得四氫葉酸的純度僅為85%?(HPLC)。綜上所述采用這種方法所得的四氫葉酸由于產率跟純度均較低，且未解決后續提純的問題，使得這種方法很難在工業上實現大規模生產。

二氫葉酸還原酶法(WO2007084738及US2007190596)是采用生物酶法還原，酶法最大的好處是專一性，它能夠將二氫葉酸直接還原成具有生理活性的(6S)-四氫葉酸，合成的(6S)-四氫葉酸可以用于合成左亞葉酸及(6S)-5-甲基四氫葉酸，是一種理想的方法。但是它的生產過程中需要使用大量的輔酶NADPH，并且還需要建設相配套的NADPH再生系統。目前該方法僅適合在實驗室進行，工業上，技術和設備復雜，成本較高，所以要將這種方法用于大規模生產還很困難。