[發(fā)明專利]一種快速微量檢測(cè)鮮河鲀血液中TTX反相離子對(duì)HPLC法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110317505.7
• 申請(qǐng)日: 2011-10-19
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102445509A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-05-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 尹紹武;劉子列;何百彩
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京師范大學(xué);揚(yáng)中市河豚協(xié)會(huì)
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 南京知識(shí)律師事務(wù)所 32207
• 代理人: 盧亞麗

1.一種快速微量檢測(cè)鮮河鲀血液中TTX反相離子對(duì)HPLC法，依次包括下列步驟：(1)鮮河鲀魚(yú)血液樣品采集與前處理；(2)配制流動(dòng)相；(3)配制標(biāo)準(zhǔn)樣品；(4)設(shè)置色譜分析條件；(5)進(jìn)樣檢測(cè)分析與結(jié)果判斷。

2.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的快速微量檢測(cè)鮮河鲀血液中TTX?HPLC法，(1)鮮河鲀魚(yú)血液樣品采集與前處理：以無(wú)菌注射器吸取約50μL肝素鈉注射液，于解剖的河鲀腹腔動(dòng)脈吸取血樣1mL于1.5mL離心管中，離心10min后取0.5mL上清液過(guò)SupeLcLean?LC-18柱，所述SupeLcLean?LC-18柱使用前分別用3mL甲醇、3mL?0.2%乙酸活化，流速1mL/min；然后用0.75mL?0.2%乙酸淋洗C18小柱，合并兩次收集液于1.5mL離心管中13000rpm/min離心10min，取1.0mL上清液于做好標(biāo)記的樣品瓶中待分析。

3.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的快速微量檢測(cè)鮮河鲀血液中TTX?HPLC法，其特征在于所述步驟(2)配制流動(dòng)相：50mmol/L磷酸二氫銨、10mmol/L庚烷磺酸鈉分別用磷酸將pH調(diào)至4.0后用0.22μm濾膜過(guò)濾；分別量取磷酸二氫銨和庚烷磺酸鈉溶液890mL與HPLC級(jí)的乙腈110mL，合并混勻后超聲波脫氣。

4.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的快速微量檢測(cè)鮮河鲀血液中TTX?HPLC法，其特征在于步驟?(4)色譜條件：色譜柱：Agilent?Poroshell?120?EC-C18?4.6mm×?150mm2.7μm；流動(dòng)相：11%乙腈-89%?50mmol/L磷酸二氫銨-10mmol/L庚烷磺酸鈉（V/V），pH?4.0；進(jìn)樣量20μL；柱溫25℃；檢測(cè)波長(zhǎng)200nm；流速0.6mL/min。