[發明專利]一種同時檢測敵百蟲和久效磷的方法

有效

• 申請號: 201110316910.7
• 申請日: 2011-10-18
• 公開（公告）號: CN102507820A
• 公開（公告）日: 2012-06-20
• 發明（設計）人: 徐志祥;辛軍紅;喬旭光
• 申請（專利權）人: 山東農業大學
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種同時檢測敵百蟲和久效磷的方法，屬于食品安全檢測技術領域。

背景技術

????目前在使用的農藥中，有機磷類農藥的應用最廣(已超過100種)，毒性最大。敵百蟲和久效磷是有機磷農藥中的廣譜殺蟲劑，具有高效、低毒、低殘留、水溶性好等特點，常被用作殺蟲劑噴灑在果樹、蔬菜上，雖然它比有機氯農藥較易降解，殘留期較短，但有機磷農藥毒性也較高，如果殘留在水果、蔬菜上的農藥或進入環境中的農藥進入有機體，大部分對生物體內膽堿酯酶有抑制作用，抑制膽堿酯酶使其失去分解乙酰膽堿的能力，造成乙酰膽堿積累，引起神經功能紊亂，從而導致肌體的損害。作為乙酰膽堿抑制劑，有機磷農藥的環境暴露和皮膚接觸會引起生物中毒。

農藥多殘留檢測是國內外食品安全領域研究和發展的熱點，目前主要采用氣相色譜、液相色譜、免疫分析、氣相色譜-質譜(GC-MS)?和液相色譜-質譜(LC-MS)?等方法。色譜-質譜法檢測靈敏度高但價格昂貴。色譜法檢出限高（一般為10-500?μg?kg^-1），不能滿足痕量農藥殘留和出口貿易檢測的實際需要(日本肯定列表對農藥殘留限量值為10?μg?kg^-1)，因此在分析之前通常需要進行富集。目前采用的前處理方法主要有固相萃取、液-液萃取、基質分散固相萃取、固相微萃取、超臨界流體萃取和柱層析等。其中固相萃取和固相微萃取較液-液萃取有許多優點，逐漸代替液-液萃取。但基于商品化的固相萃取材料往往選擇性較差，目標物與吸附劑之間的作用力是非特異性的，提取凈化的效率不高，有時還很難徹底清除基質的干擾，而且成本也較高。因此利用分子印跡技術合成對敵百蟲和久效磷具有特異識別能力的吸附功能材料，并與氣相色譜聯用，使檢測過程簡單、快速且具有高的靈敏度，對保證我國食品中有機磷農藥的有效檢測和監控監管具有十分重要的意義。

發明內容??

為了克服傳統的敵百蟲和久效磷檢測方法中存在的檢測時間長、儀器價格昂貴、準確度差、前處理煩瑣等缺陷，本發明提供了一種同時檢測敵百蟲和久效磷的方法。

一種同時檢測敵百蟲和久效磷的方法，是按以下步驟完成的：

1.?分子印跡聚合物的制備：在氯仿溶液中，將敵百蟲和久效磷混合物（1:1，摩爾比）、功能單體3-氨基丙基三乙氧基硅烷、交聯劑乙二醇二甲基丙烯酸酯以1:4:10的摩爾比例混合均勻，然后加入100mg偶氮二異丁腈作為引發劑進行聚合反應；將獲得的聚合物磨碎后用300?mL甲醇/冰乙酸（9:1，v/v）連續萃取8?h，再用300?mL甲醇萃取4?h，干燥后得分子印跡聚合物。

2.?分子印跡固相萃取與氣相色譜聯用體系的建立?

以制備的分子印跡聚合物作為固相萃取的吸附劑，并與氣相色譜聯用，建立分子印跡固相萃取與氣相色譜聯用檢測體系。

a.?分子印跡固相萃取流程：

將步驟1得到的100?mg印跡聚合物填充到固相萃取柱中，制備分子印跡固相萃取柱，并分別用5?mL甲醇和5?mL水沖洗。然后將100?mL0.05mg?L^-1敵百蟲和久效磷的混合標準水溶液流過分子印跡固相萃取柱，流速為2.0?mL?min^-1。富集結束后，用2?mL的混合溶液（甲醇：水：冰乙酸=95:5:2,?v/v/v）洗脫，洗脫液用高純氮氣吹干，然后用0.2?mL丙酮復溶并用孔徑為0.45?μm的濾膜過濾得到濾液；取1?μL的濾液進行氣相色譜分析。富集結束后用6?mL的甲醇/冰乙酸（9:1,?v/v）沖洗分子印跡固相萃取柱以用于下一次樣品預處理。

b.?氣相色譜檢測:?

GC-2010?FPD檢測器；色譜柱：RTX-1701(30.0?m?×0.25?mm?×0.25μm中性毛細管柱)；柱溫：90?℃，停1.0?min，以30?℃?min^-1的速度上升到150℃，停3.0?min，再以1℃?min^-1?的速度上升到170℃，停2.0?min，再以30?℃?min^-1的速度上升到250?℃，停4.0?min，共35?min。進樣口溫度：200?℃，FPD檢測器溫度：250℃，載氣為高純氮氣，總流量：14.0?mL?min^-1，柱流量：1.0?mL?min^-1，吹掃流量：3.0?mL?min^-1，尾吹流量：30.0?mL?min^-1，壓力：90.9?kPa，進樣量：1?μL，分流比：10:?1，得到色譜峰面積。