[發(fā)明專利]一種利用固定化擬無枝酸菌分段發(fā)酵無錫他汀的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110316323.8
• 申請日: 2011-10-18
• 公開（公告）號: CN102373249A
• 公開（公告）日: 2012-03-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 諸葛斌;曹艷輝;諸葛健;方慧英
• 申請（專利權(quán)）人: 江南大學(xué);無錫天沁生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: C12P17/06
• 分類號: C12P17/06;C12N11/10;C12N11/04;C12R1/01
• 代理公司: 北京匯信合知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11335
• 代理人: 王秀麗

1.一種利用固定化擬無枝酸菌分段發(fā)酵無錫他汀的方法，其特征在于將擬無枝酸菌細胞進行固定化處理后，采用pH以及發(fā)酵時間兩階段發(fā)酵控制生產(chǎn)無錫他汀。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述擬無枝酸菌固定化方法為：

將培養(yǎng)好的種子菌懸液與海藻酸鈉溶液按照1∶5的比例充分混勻，然后用注射器將其滴入CaCl₂溶液中，固定1h，濾出小珠，用蒸餾水洗凈，得到固定化細胞。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述擬無枝酸菌固定化方法為：將培養(yǎng)好的種子菌懸液與20g/L海藻酸鈉溶液按照1mL菌懸液/5mL凝膠的比例充分混勻，然后用注射器將其滴入10g/L的CaCl₂溶液中，注射高度為10cm，固定1h，濾出小珠，用蒸餾水洗凈，得到粒徑為3mm左右的固定化細胞。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的方法，其特征在于所述兩階段發(fā)酵控制條件為：發(fā)酵第一階段，固定化細胞經(jīng)過增殖培養(yǎng)后，按1.0-3.0g/L的濃度加入洛伐他汀溶液，30℃發(fā)酵48h生成產(chǎn)物I，發(fā)酵pH為7.5；發(fā)酵第二階段，將第一階段發(fā)酵結(jié)束的固定化細胞洗凈，加入新鮮轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基，按照0.1-0.3g/L的的濃度加入產(chǎn)物I溶液，30℃發(fā)酵10h生成無錫他汀，發(fā)酵pH為5.5。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的方法，其特征在于所述擬無枝酸菌可用于多次發(fā)酵，用無菌去離子水將上一批發(fā)酵結(jié)束的固定化細胞沖洗三次，加入新鮮轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基，進行下一批發(fā)酵。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述擬無枝酸菌最適發(fā)酵批次為5批。

7.根據(jù)權(quán)利要求1-3所述的方法，其特征在于所述擬無枝酸菌為孢子種子液。