[發明專利]N4—乙酰胞苷的制備方法

有效

• 申請號: 201110310979.9
• 申請日: 2011-10-14
• 公開（公告）號: CN102690310A
• 公開（公告）日: 2012-09-26
• 發明（設計）人: 李恕;劉慶瑩;劉勇;石維
• 申請（專利權）人: 珍奧集團股份有限公司
• 主分類號: C07H19/067
• 分類號: C07H19/067;C07H1/00
• 代理公司: 大連非凡專利事務所 21220
• 代理人: 閃紅霞

技術領域

本發明涉及一種N₄—乙酰胞苷的制備方法，尤其是一種操作簡單、產品純度高、得率大，適合于大規模工業化生產的N₄—乙酰胞苷的制備方法。

背景技術

大分子脫氧核糖核酸（DNA）及核糖核酸（RNA）的單體是核苷酸，核苷酸水解掉磷酸成為核苷。核苷是生命體系中的基本構建物，具有廣泛的生物活性。胞嘧啶核苷（胞苷）對機體脂類代謝有著直接影響，同時胞苷的類似物在臨床上具有抗病毒及抗腫瘤的獨特療效。N₄—乙酰胞苷是胞苷堿基雜環上的4位活性氨基經?；揎椀漠a物，是生產胞苷類似物的藥物中間體。N₄—乙酰胞苷為白色或灰白色結晶粉末，熔點為199^。C，產品純度達98%，國際上已將其注冊化學物質登錄號（CAS），編號為3768-18-1。

目前，國內外關于制備N4—乙酰胞苷的報道較少。1963年，Khorana.H?.G?及其合作者創設苷類物質雜環上活性氨基的?；椒ǎ乎；焯腔蛎撗跷焯巧纤辛u基以及堿基雜環上的活性氨基，然后選擇性的水解掉戊糖或脫氧戊糖上的—O—酯，保留堿基上的?；鶊F。1982年Jones等人的方法是先用甲硅烷基將糖上的羥基加以瞬間保護，再將雜環上的活性氨基?；?。以上兩種方法，因為均涉及對糖上的羥基進行處理，存在著操作復雜的問題。2006年又有關于核苷類似物質堿基上活性氨基?；椒ǖ南嚓P報道，是用對硝基苯酚將相應的酸活性為酯，再用該酯與二環已基碳二亞胺作為偶聯劑，完成核苷堿基上的活性氨基的N位?；?。雖然避開了對糖上的羥基進行處理，但卻存在著中間產物的污染問題，而克服中間產物仍導致操作方法復雜。

發明內容

本發明是為了解決現有技術存在的上述技術問題，提供一種操作簡單、產品純度高、得率大，適合于大規模工業化生產的N₄—乙酰胞苷的制備方法。

本發明的技術解決方案是：一種N₄—乙酰胞苷的制備方法，其特征在于依次按如下步驟進行：

a.?稱取胞苷置于燒杯中；

b.?加入?NN二甲基甲酰胺，攪拌8~15min；所述NN二甲基甲酰胺與胞苷的比例為8~12ml：1g；

c.?加入乙酸酐，20~25℃下攪拌22~26小時；所述乙酸酐與胞苷的比例為0.3~0.5ml：1g；

d.?于28~32℃水浴真空濃縮，蒸干至油狀物出現；

e.?加入乙酸乙酯和乙醚混合物（1：1），攪拌研磨；所述乙酸乙酯和乙醚混合物與胞苷的比例為3~5ml：1g；

f.?加入NaHCO₃，繼續研磨；所述NaHCO₃與胞苷的質量比為0.3~0.4：1；

g.?加入純水洗滌，充分震蕩后棄上清液，將沉淀物凍干；

h.?配制5%?HCl，洗脫陰離子交換樹脂層析柱，再用純水洗脫至PH值7.0~7.5，將上述g步驟獲得的沉淀物用水溶解后加入柱上，用純水洗脫，分5個階段收集洗脫液，每階段收集5管；

i.?取中間管洗脫液進行減壓蒸餾、凍干。

本發明是直接將胞苷6?元雜環上的4位活性氨基乙?；?，即不涉及核苷戊糖上的羥基，也不存在中間產物的污染，所得產品分子量與分子結構與CAS注冊的N4—乙酰胞苷完全一致，產品得率可達50~60%、純度可達98%以上，符合國際標準達到試劑級水平，本發明方法更加簡單、便捷，適合于大規模工業化生產。

具體實施方式

實施例1：

a.?稱取1g胞苷置于100?ml燒杯中；

b.?加入10ml?NN二甲基甲酰胺，放入磁力棒攪拌10min；

c.?加入0.39ml乙酸酐，20~22℃下攪拌24小時；

d.?于28~30℃水浴真空濃縮，蒸干至油狀物出現；

e.?加入4ml乙酸乙酯和乙醚混合物（1：1），攪拌研磨；

f.?加入0.345g?NaHCO₃，繼續研磨；

g.?加入純水洗滌，充分震蕩后棄上清液，將沉淀物凍干；

h.?配制5%?HCl，洗脫陰離子交換樹脂層析柱，再用純水洗脫至PH值7.0~7.5，將上述g步驟獲得的沉淀物用水溶解后加入柱上，用純水洗脫，分5個階段收集，每階段收集5管，每管收集0.5ml洗脫液；

i.?取中間15管共7.5ml洗脫液進行減壓蒸餾、凍干，得0.6g凍干品。

實驗：