[發(fā)明專利]胚胎干細(xì)胞體外分化中藥活性物質(zhì)藥效篩選模型的建立及應(yīng)用

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110310493.5
• 申請(qǐng)日: 2011-10-14
• 公開（公告）號(hào): CN103045536A
• 公開（公告）日: 2013-04-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 田杰
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京清美聯(lián)創(chuàng)干細(xì)胞科技有限公司
• 主分類號(hào): C12N5/077
• 分類號(hào): C12N5/077;C12N5/0793;C12N5/071;C12Q1/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種胚胎干細(xì)胞體外定向分化藥物篩選模型的構(gòu)建及應(yīng)用，其特征是：在藥物誘導(dǎo)下，使胚胎干細(xì)胞(ES)定向分化成單一類型細(xì)胞，構(gòu)建高效率藥效篩選模型，并利用該模型進(jìn)行中藥活性成分藥效篩選和評(píng)估，本發(fā)明主要分以下幾個(gè)步驟：

(1)利用已有的ES細(xì)胞的支持培養(yǎng)；

(2)藥物誘導(dǎo)ES細(xì)胞定向分化為單一類型細(xì)胞的培養(yǎng)；

(3)利用該模型進(jìn)行藥效篩選與評(píng)估。

2.如權(quán)利要求1所述的利用已有的ES細(xì)胞的支持培養(yǎng)，其特征是：選用小鼠胚胎干細(xì)胞D3細(xì)胞株(ES-D3細(xì)胞株)，接種于滋養(yǎng)層細(xì)胞上，按常規(guī)方法進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3.如權(quán)利要求1所述的藥物誘導(dǎo)ES細(xì)胞定向分化為單一類型細(xì)胞的培養(yǎng)，其特征是：當(dāng)誘導(dǎo)定向分化為單一類型細(xì)胞時(shí)，這類細(xì)胞包含心肌細(xì)胞，用培養(yǎng)基將ES-D3細(xì)胞制成單細(xì)胞懸液，再懸滴培養(yǎng)成擬胚體，擬胚體進(jìn)行貼壁培養(yǎng)，加入供試藥物共同培養(yǎng)，以擬胚體細(xì)胞團(tuán)出現(xiàn)特定標(biāo)志，作為定向分化成功的指標(biāo)。

4.如權(quán)利要求3所述的藥物誘導(dǎo)ES細(xì)胞定向分化為單一類型細(xì)胞的培養(yǎng)，其特征是：當(dāng)誘導(dǎo)定向分化為心肌細(xì)胞時(shí)，擬胚體細(xì)胞團(tuán)出現(xiàn)的特定標(biāo)志是有節(jié)律地搏動(dòng)。

5.如權(quán)利要求3所述的藥物誘導(dǎo)ES細(xì)胞定向分化為單一類型細(xì)胞的培養(yǎng)，其特征是：測(cè)試藥物可以是銀杏黃酮、黃芪、淫羊藿苷、葛根素、丹參等中藥活性物質(zhì)。

6.如權(quán)利要求1所述的胚胎干細(xì)胞體外定向分化藥物篩選模型的構(gòu)建及應(yīng)用，其特征是：利用該方法，可構(gòu)建心肌細(xì)胞定向分化模型、神經(jīng)元定向分化模型、血管發(fā)生定向分化模型及其他多種單一類型細(xì)胞模型，用于藥效初步篩選與評(píng)估。