[發(fā)明專利]一種紫穗槐螺酮的制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110303726.9
• 申請日: 2011-10-10
• 公開（公告）號: CN102424684A
• 公開（公告）日: 2012-04-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉東鋒;萬冬梅
• 申請（專利權(quán)）人: 南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號: C07D493/20
• 分類號: C07D493/20
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于中藥提取分離技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種從紫穗槐葉中分離制備紫穗槐螺酮的方法。

背景技術(shù)

紫穗槐螺酮來源于豆科紫穗槐（Amorpha?fruticosa?L.）的干燥葉。紫穗槐原產(chǎn)美國。廣布于中國東北、華北、河南、華東、湖北、四川等省（區(qū)），是黃河和長江流域很好的水土保持植物。

紫穗槐葉主要有效成分為黃酮類化合物，以紫穗槐螺酮含量最高。紫穗槐螺酮具有細(xì)胞毒活性，有顯著的選擇性細(xì)胞毒活性，對KB和RPMI-7951細(xì)胞的ED₅₀分別為（μg/ml）0.58和0.61。對TPA誘導(dǎo)的EB病毒早期抗原（EBV-EA）有顯著抑制作用，其活性于VA酸和甘草次酸相當(dāng)。

目前，尚未見高含量紫穗槐螺酮的制備方法報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種紫穗槐螺酮的制備方法。

本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

（1）取紫穗槐葉，經(jīng)粉碎處理，加入到超臨界CO₂萃取器中，用乙醇作為夾帶劑，進(jìn)行萃取，得到萃取物；

（2）萃取物加入乙酸乙酯攪拌使溶解，過濾，濾液濃縮干燥，得粗提物；

（3）采用高速逆流色譜法分離純化粗提物中的紫穗槐螺酮，其兩相溶劑系統(tǒng)為石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，上相注滿高速逆流色譜柱為固定相，轉(zhuǎn)動(dòng)主機(jī)，泵入下相做流動(dòng)相，流動(dòng)相溶解粗提物由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集紫穗槐螺酮組分；

（4）將紫穗槐螺酮組分進(jìn)行真空濃縮，析出結(jié)晶，濾出結(jié)晶，加入80%甲醇回流溶解，放置重結(jié)晶，過濾、洗滌干燥即得紫穗槐螺酮。

所述步驟（1）中的超臨界CO₂萃取參數(shù)條件為萃取溫度為35-50℃，萃取壓力為25-32MPa，萃取時(shí)間為2-4h，分離釜Ⅰ溫度為30-40℃，壓力為8-10MPa，分離釜Ⅱ溫度為28-35℃，壓力為5-7MPa，CO₂流量為3-5ml/g生藥/min。

所述步驟（1）中夾帶劑的用量為藥材重量的10-20%。

所述步驟（3）中石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水溶劑系統(tǒng)的體積比為5-8:1-3:4-7:1-3。

本方法積極效果是：

（1）本方法采用超臨界CO₂萃取，能耗低，萃取劑CO₂清潔無污染；

（2）本方法采用高速逆流色譜法，收率高、制備量大、制備周期短，解決了柱層析效率低而且污染嚴(yán)重的技術(shù)缺陷；

（3）本方法工藝步驟操作較簡單，易操作，所得產(chǎn)品純度高。

下面將結(jié)合具體實(shí)施方式進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1：

取紫穗槐葉，經(jīng)粉碎處理，稱取1kg，加入到超臨界CO₂萃取器中，用乙醇作為夾帶劑，用量為藥材重量的10%，進(jìn)行萃取，萃取溫度為35℃，萃取壓力為25MPa，CO₂流量為3ml/g生藥/min，萃取時(shí)間為2h，分離釜Ⅰ溫度為30℃，壓力為8MPa，分離釜Ⅱ溫度為28℃，壓力為5MPa，得到萃取物，用乙酸乙酯攪拌使溶解，過濾，濾液濃縮干燥，得粗提物；采用高速逆流色譜法分離純化粗提物中的紫穗槐螺酮，其兩相溶劑系統(tǒng)為石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，體積比為5:?3:4:2，上相注滿高速逆流色譜柱為固定相，轉(zhuǎn)動(dòng)主機(jī)，泵入下相做流動(dòng)相，流動(dòng)相溶解粗提物由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，檢測波長為209nm，收集紫穗槐螺酮組分，真空濃縮，析出結(jié)晶，濾出結(jié)晶，加入80%甲醇回流溶解，放置重結(jié)晶，過濾、洗滌干燥即得紫穗槐螺酮，含量96.5%。

實(shí)施例2：