[發明專利]一種6-羥基硫雙萍蓬草定堿的制備方法

無效

• 申請號: 201110303489.6
• 申請日: 2011-10-10
• 公開（公告）號: CN102391281A
• 公開（公告）日: 2012-03-28
• 發明（設計）人: 劉東鋒;郭琴
• 申請（專利權）人: 南京澤朗醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07D493/20
• 分類號: C07D493/20
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于天然藥物提取技術領域，涉及一種6-羥基硫雙萍蓬草定堿的制備方法。

背景技術

6-羥基硫雙萍蓬草定堿（Hydroxythiobinupharidine）分子式為C₃₀H₄₂N₂O₃S，分子量為510.74。CAS登錄號為50478-55-2。是從睡蓮科（Nymphaeaceae）植物黃萍蓬草Nuphar?luteum(L.)J.E.Smith根莖、萍蓬草Nuphar?pumilum(Timm.)DC.根莖中分離得到的一種萜類生物堿。萍蓬草根莖甘平無毒，具有清熱滋補、補虛健胃、止血通經等功效，用于治療病后體弱、神經衰弱、消化不良、月經不調、刀傷等癥。其主要化學成分為生物堿。藥理研究表明，6-羥基硫雙萍蓬草定堿具有較強的免疫抑制活性，在濃度為1μM時，對小鼠脾細胞的斑塊形成細胞（plaque?forming?cell）有顯著的抑制活性，而在此濃度下對小鼠脾細胞無細胞毒性。

發明內容

本發明的目的在于提供一種操作簡便、分離量大、樣品損失少、產品含量高的快速制備6-羥基硫雙萍蓬草定堿的方法。

本發明的目的是通過以下技術方案實現的：

一種6-羥基硫雙萍蓬草定堿的制備方法，其特征在于包括以下步驟：將干燥的萍蓬草根莖粉碎后用質量分數1-5%的酸性水溶液室溫浸泡提取，浸提液過濾上強酸性陽離子交換樹脂，待飽和吸附后，用堿性甲醇溶液洗脫，合并洗脫液，濃縮得浸膏，所得浸膏經高速逆流色譜法分離得到純度98%以上的6-羥基硫雙萍蓬草定堿。

所述酸性水溶液為鹽酸水溶液、硫酸水溶液或磷酸水溶液。

所述強酸性陽離子交換樹脂為732型陽離子交換樹脂、D001型陽離子交換樹脂、HZ002型陽離子交換樹脂或JK006型陽離子交換樹脂。

所述堿性甲醇溶液為70-85%甲醇水溶液（含氨水0.4-0.7%）。

所述高速逆流色譜純化：以乙醚-二氯甲烷-磷酸鹽緩沖液為溶劑系統，體積比為（15-20）：（18-25）：（5-10），以上相為固定相，下相為流動相。

本發明的優勢在于：本發明避免了使用大量有機溶劑，酸水溶液可循環使用，大大降低了提取成本，浸提液通過離子交換樹脂，用堿性醇溶液洗脫，降低了有機溶劑的使用量和損耗；采用高速逆流色譜法分離純化，分離效果好，產品無損失、純度高。

具體實施方式

下面結合實施例詳細說明本發明的技術方案，但保護范圍不被此限制。

實施例1：

將1000g萍蓬草根莖粉碎成粗粉投入提取罐中，加入12倍藥材量的質量分數為2%的鹽酸水溶液，室溫浸泡提取2小時，將浸提液過濾上HZ002型陽離子交換樹脂柱，下柱液用于繼續浸泡萍蓬草根莖粗粉，浸提液再上陽離子交換樹脂柱，至浸出液生物堿呈陰性反應，待陽離子交換樹脂柱飽和吸附后，用6BV70%的甲醇水溶液（含氨水0.6%）洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮成浸膏。

采用乙醚-二氯甲烷-磷酸鹽緩沖液溶劑系統分離純化萍蓬草浸膏，體積比為17.5:23:6，以上相為固定相，下相為流動相，根據色譜圖收集相應組分，調pH至8.5，用二氯甲烷萃取，回收二氯甲烷，得到純度98%以上的6-羥基硫雙萍蓬草定堿。

實施例2：

將1000g萍蓬草根莖粉碎成粗粉投入提取罐中，加入15倍藥材量的質量分數為1%的磷酸水溶液，室溫浸泡提取3小時，將浸提液過濾上D001型陽離子交換樹脂柱，下柱液用于繼續浸泡萍蓬草根莖粗粉，浸提液再上陽離子交換樹脂柱，至浸出液生物堿呈陰性反應，待陽離子交換樹脂柱飽和吸附后，用6BV75%的甲醇水溶液（含氨水0.4%）洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮成浸膏。

采用乙醚-二氯甲烷-磷酸鹽緩沖液溶劑系統分離純化萍蓬草浸膏，體積比為15:24:8，以上相為固定相，下相為流動相，根據色譜圖收集相應組分，調pH至8.0，用二氯甲烷萃取，回收二氯甲烷，得到純度98%以上的6-羥基硫雙萍蓬草定堿。

實施例3：

將1000g萍蓬草根莖粉碎成粗粉投入提取罐中，加入10倍藥材量的質量分數為3%的硫酸水溶液，室溫浸泡提取2.5小時，將浸提液過濾上JK006型陽離子交換樹脂柱，下柱液用于繼續浸泡萍蓬草根莖粗粉，浸提液再上陽離子交換樹脂柱，至浸出液生物堿呈陰性反應，待陽離子交換樹脂柱飽和吸附后，用7BV80%的甲醇水溶液（含氨水0.7%）洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮成浸膏。