[發(fā)明專利]一種肝素的檢測方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110302864.5
• 申請(qǐng)日: 2011-09-30
• 公開（公告）號(hào): CN102445483A
• 公開（公告）日: 2012-05-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 秦偉;陳燕
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院煙臺(tái)海岸帶研究所
• 主分類號(hào): G01N27/333
• 分類號(hào): G01N27/333
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標(biāo)代理有限公司 21002
• 代理人: 周秀梅;李穎

1.一種肝素的檢測方法，其特征在于：利用離子選擇性電極黏附的聚合物敏感膜相中魚精蛋白與水相中肝素的特異性結(jié)合，通過電位測定儀測定加入不同濃度肝素后的電位變化，根據(jù)引起的電位變化速率測定待測樣品中肝素的濃度。

2.按權(quán)利要求1所述的肝素的檢測方法，其特征在于：利用離子選擇性電極黏附的聚合物敏感膜中魚精蛋白與待測溶液中的肝素形成絡(luò)合物進(jìn)入水相，同時(shí)膜相中氯離子也隨著魚精蛋白進(jìn)入水相，引起電位的變化，根據(jù)電位的初始變化速率即得到待測樣品中肝素的濃度。

3.按權(quán)利要求1或2所述的肝素的檢測方法，其特征在于：所述聚合物敏感膜中加入親脂性的惰性鹽增加聚合物膜的導(dǎo)電性。

4.按權(quán)利要求1或2所述肝素的檢測方法，其特征在于：所述離子選擇性電極頭上黏附的聚合物敏感膜是由聚合物基體材料、增塑劑、離子載體和親脂性的惰性鹽組成，按重量份數(shù)比為20-40∶40-80∶0.1-10∶0.1-10混合，混合后融入到過量四氫呋喃溶液中，攪拌使之成為均勻溶液，然后室溫下放置12-24h，即得到有彈性的聚合物敏感膜；所述聚合物基體材料為聚氯乙烯、聚丁基丙烯酸酯、聚丙烯酸丁酯、聚醚酰亞胺、橡膠或溶膠凝膠膜；增塑劑為鄰-硝基苯辛醚(o-NPOE)、二-2-乙基己基癸酯、癸二酸二丁酯或癸二酸二辛酯；離子載體為魚精蛋白，親脂性的惰性鹽為四(十二烷基)-四(4-氯苯基)硼酸銨(ETH500)。

5.按權(quán)利要求1所述的肝素的檢測方法，其特征在于：檢測過程具體為：

a.將未經(jīng)活化的離子選擇性電極直接插入盛有緩沖溶液的測量池中，待電極穩(wěn)定后得到基線電位；

b.將標(biāo)準(zhǔn)肝素加入測量池中，肝素與電極膜表面的魚精蛋白作用，電位下降；所述離子選擇性電極內(nèi)插有內(nèi)參比電極，同時(shí)Tris-HCl緩沖溶液和0.12M?NaCl為內(nèi)充液注入離子選擇性電極內(nèi)，并且底部黏附聚合物敏感膜；

c.根據(jù)加入肝素后初始電位變化速率對(duì)肝素濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；

d.將未經(jīng)活化的離子選擇性電極直接插入盛有待測樣品的測量池中，產(chǎn)生樣品信號(hào)；通過樣品溶液的初始電位變化速率與標(biāo)準(zhǔn)工作曲線對(duì)照得到待測肝素的濃度。