[發(fā)明專利]馬鈴薯莖尖脫毒育種方法及雙層培養(yǎng)基

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110299572.0
• 申請(qǐng)日: 2011-09-28
• 公開（公告）號(hào): CN102342248A
• 公開（公告）日: 2012-02-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李亞雄
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 金色種業(yè)有限公司
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 北京海虹嘉誠知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11129
• 代理人: 吳小燦

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及脫毒育種技術(shù)及固態(tài)組培基質(zhì)技術(shù)，特別是一種馬鈴薯莖尖脫毒育種方法及雙層培養(yǎng)基。

背景技術(shù)

采用培養(yǎng)基進(jìn)行馬鈴薯莖尖脫毒育種是國內(nèi)國際應(yīng)用的先進(jìn)技術(shù)。現(xiàn)有培養(yǎng)基技術(shù)分成兩大部分：即組織培養(yǎng)和試管薯誘導(dǎo)出薯兩部分，使用兩種培養(yǎng)基，先用組織培養(yǎng)基培養(yǎng)苗，苗長成后再加入誘導(dǎo)培養(yǎng)基。暗光培養(yǎng)。這種技術(shù)污染率高，損失大，所以國內(nèi)國際均未大規(guī)模使用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺陷或不足，提供一種馬鈴薯莖尖脫毒育種方法及雙層培養(yǎng)基，以提高效率，并降低污染率。

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

馬鈴薯莖尖脫毒育種方法，其特征在于，利用雙層培養(yǎng)基植入馬鈴薯莖尖后一次性成苗出試管薯，省卻成苗后的移栽培養(yǎng)步驟；所述雙層培養(yǎng)基包括一個(gè)培養(yǎng)基底層和堆疊在所述底層之上的一個(gè)培養(yǎng)基上層，所述培養(yǎng)基底層為制備好的誘導(dǎo)培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基上層為制備好的組織培養(yǎng)基；所述馬鈴薯莖尖植入在組織培養(yǎng)基中成苗；待苗長成后直接進(jìn)入暗光培養(yǎng)，在所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基中出試管薯。

所述待苗長成后直接進(jìn)入暗光培養(yǎng)是指當(dāng)苗長成至預(yù)設(shè)的一定高度后直接進(jìn)入暗光培養(yǎng)。

所述雙層培養(yǎng)基中每一層都是固態(tài)培養(yǎng)基。

所述雙層培養(yǎng)基被設(shè)置在培養(yǎng)容器內(nèi)，在培養(yǎng)容器內(nèi)先裝入制備好的誘導(dǎo)培養(yǎng)基形成一個(gè)培養(yǎng)基底層，然后裝入制備好的組織培養(yǎng)基形成一個(gè)培養(yǎng)基上層。

一種雙層培養(yǎng)基，其特征在于，所述雙層培養(yǎng)基包括一個(gè)培養(yǎng)基底層和堆疊在所述底層之上的一個(gè)培養(yǎng)基上層，所述培養(yǎng)基底層為制備好的誘導(dǎo)培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基上層為制備好的組織培養(yǎng)基。

利用培養(yǎng)容器制備雙層培養(yǎng)基的方法，其特征在于，將組織培養(yǎng)基和誘導(dǎo)培養(yǎng)基分別制備，先將誘導(dǎo)培養(yǎng)基裝入培養(yǎng)容器滅菌，將滅菌的誘導(dǎo)培養(yǎng)基在無菌室內(nèi)降溫至凝固成固態(tài)；再將組織培養(yǎng)基放入生物反應(yīng)器內(nèi)滅菌，待滅菌基質(zhì)降至一定溫度時(shí)，在無菌操作條件下將組織培養(yǎng)基放入裝有誘導(dǎo)培養(yǎng)基的容器中，待組織培養(yǎng)基降至常溫時(shí)，即得雙層培養(yǎng)基。

所述在無菌室內(nèi)降溫至凝固成固態(tài)是指在無菌室內(nèi)降溫至15℃或以下。

所述待滅菌基質(zhì)降至一定溫度，是指待滅菌基質(zhì)降至50℃或以下。

所述常溫是指20～25℃。

本發(fā)明的技術(shù)效果如下：

該項(xiàng)技術(shù)實(shí)施后，可以降低污染10％以上，同時(shí)節(jié)省勞動(dòng)力20％左右，試管薯結(jié)薯率提高20％左右，試管薯均重提高50％左右。該項(xiàng)技術(shù)實(shí)施后，以全國馬鈴薯7000萬畝計(jì)算，可以節(jié)省土地面積600萬畝左右。

具體實(shí)施方式

馬鈴薯莖尖脫毒育種是國內(nèi)國際應(yīng)用的先進(jìn)技術(shù)，現(xiàn)有培養(yǎng)基技術(shù)分成兩大部分：即組織培養(yǎng)和試管薯誘導(dǎo)出薯兩部分，使用兩種培養(yǎng)基，先用組織培養(yǎng)基培養(yǎng)苗，苗長成后再加入誘導(dǎo)培養(yǎng)基。暗光培養(yǎng)。這種技術(shù)污染率高，損失大，所以國內(nèi)國際均未大規(guī)模使用。

本項(xiàng)目發(fā)明使用雙層培養(yǎng)基技術(shù)，解決了現(xiàn)有的問題。

具體辦法如下：將組織培養(yǎng)基和誘導(dǎo)培養(yǎng)基分別制備，先將誘導(dǎo)培養(yǎng)基裝入培養(yǎng)容器滅菌，將滅菌的培養(yǎng)基在無菌室內(nèi)降溫到15℃凝固成固態(tài)，再將組織培養(yǎng)基放入生物反應(yīng)器內(nèi)滅菌，待滅菌基質(zhì)降至50℃時(shí)，在無菌操作條件下將組織培養(yǎng)基分別放入裝有誘導(dǎo)培養(yǎng)基的容器中，待培養(yǎng)基降至常溫(20-25℃)，即可接入苗，苗在規(guī)定的溫度、光照、溫度條件下長成至所需高度，直接進(jìn)入暗光培養(yǎng)，即可出試管薯。

該項(xiàng)技術(shù)實(shí)施后，可以降低污染10％以上，同時(shí)節(jié)省勞動(dòng)力20％，試管薯結(jié)薯率提高20％，試管薯均重提高50％。該項(xiàng)技術(shù)實(shí)施后，以全國馬鈴薯7000萬畝計(jì)算，可以節(jié)省土地面積600萬畝。

本發(fā)明屬于脫毒育種中的MS雙層固態(tài)組培基質(zhì)設(shè)計(jì)方案。MS培養(yǎng)基中的MS是培養(yǎng)基發(fā)明人穆拉希吉克(Murashige，T.)和斯科克(Skoog，F(xiàn).)的縮寫。MS培養(yǎng)基其特點(diǎn)是無機(jī)鹽和離子濃度較高，是較穩(wěn)定的離子平衡溶液，它的硝酸鹽含量高，其養(yǎng)分的數(shù)量和比例合適，能滿足植物細(xì)胞的營養(yǎng)和生理需要，因而適用范圍比較廣，多數(shù)植物組織培養(yǎng)快速繁殖用它作為培養(yǎng)基的基本培養(yǎng)基。MS固體培養(yǎng)基可用于誘導(dǎo)愈傷組織，也可用于胚、莖段、莖尖及花藥的培養(yǎng)，其液體培養(yǎng)基用于細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時(shí)能獲得明顯的成功。

本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠參照或參考中華人民共和國農(nóng)業(yè)部發(fā)布的農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，NY/T1212-2006，馬鈴薯脫毒種薯繁育技術(shù)規(guī)程，進(jìn)一步了解本發(fā)明相關(guān)技術(shù)概念。