[發(fā)明專利]一種酪蛋白活性單肽及其制備方法與應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201110292957.4 | 申請日： | 2011-09-30 |
| 公開（公告）號： | CN102352398A | 公開（公告）日： | 2012-02-15 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 趙強忠;趙謀明;崔春;張清麗 | 申請（專利權(quán)）人： | 華南理工大學(xué) |
| 主分類號： | C12P21/06 | 分類號： | C12P21/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/20;C07K1/16;C07K7/06;A23C9/13 |
| 代理公司： | 廣州粵高專利商標(biāo)代理有限公司 44102 | 代理人： | 何淑珍 |
| 地址： | 510640 廣*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 蛋白 活性 及其 制備 方法 應(yīng)用 | ||
1.一種酪蛋白活性單肽的制備方法，其特征在于包括如下步驟：
（1）在50℃～55℃，pH?6.0-7.5的條件下加入木瓜蛋白酶對酪蛋白進行酶解，得酶解液；
（2）當(dāng)水解度達到9％～10％時，90～95℃加熱15～20min滅酶，終止酶解反應(yīng)以控制生物活性肽的分子量；
（3）將滅酶活的酶解液依次通過膜分離、大孔樹脂、凝膠色譜、反相高效液相進行分離純化，即得所述生物活性肽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟（3）中將滅酶活的酶解液在4℃下以6000?g離心20分鐘，將上清液經(jīng)超濾，取分子量小于3000道爾頓的組分，采用大孔樹脂NKA-II,?收集10-20%（w/w）乙醇洗脫液，接著采用Sephadex?G-25,流動相為去離子水，檢測波長220nm，按吸收峰順序收集；經(jīng)Sephadex?G-25分離得到的活性的組分再經(jīng)C18高效液相色譜分離純化，分離條件為：5-40%乙腈和95-60%去離子水梯度洗脫，檢測波長220nm，按吸收峰順序收集。
3.由權(quán)利要求1所述制備方法制得的具有提高發(fā)酵液中多糖含量的酪蛋白活性單肽。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的酪蛋白活性單肽，其特征在于通過液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜測定其分子量為801.4道爾頓，該活性單肽氨基酸序列為：Asn-Pro-Ser-Lys-Glu-Asn-Leu。
5.權(quán)利要求1所述的酪蛋白活性單肽的應(yīng)用，其特征在于將酪蛋白活性單肽與甘油混合應(yīng)用于發(fā)酵乳發(fā)酵中，提高發(fā)酵液中多糖含量。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于以發(fā)酵乳總重計，酪蛋白活性單肽的添加量為0.001%-0.1%。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于發(fā)酵乳總重計，甘油添加量為0.1%-2%。
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