[發明專利]一種制備D-酪氨酸的化學-酶法有效
| 申請號: | 201110292491.8 | 申請日: | 2011-09-29 |
| 公開(公告)號: | CN102352392A | 公開(公告)日: | 2012-02-15 |
| 發明(設計)人: | 夏仕文;方國蘭 | 申請(專利權)人: | 重慶郵電大學 |
| 主分類號: | C12P13/22 | 分類號: | C12P13/22 |
| 代理公司: | 重慶市恒信知識產權代理有限公司 50102 | 代理人: | 劉小紅 |
| 地址: | 400065 *** | 國省代碼: | 重慶;85 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 制備 酪氨酸 化學 酶法 | ||
1.一種制備D-酪氨酸的化學-酶法,其特征是以DL-酪氨酸為原料,在酸性介質中采用酰化劑衍生得到DL-N-苯乙酰酪氨酸,以固定化酶為生物催化劑,在水介質中對映選擇性催化DL-N-苯乙酰酪氨酸為D-N-苯乙酰酪氨酸、苯乙酸和L-酪氨酸,D-N-苯乙酰酪氨酸酸解為苯乙酸和D-酪氨酸,經濃縮、萃取、等電點調節、結晶、過濾、干燥等步驟得到D-酪氨酸;包括以下步驟:
1)DL-N-苯乙酰酪氨酸制備:在50~80℃和pH2~3條件下,以醋酸為反應介質,摩爾比為1:1~3的DL-酪氨酸與酰化劑攪拌反應10~20h;反應完成后用鹽酸調pH1~2,析出DL-N-苯乙酰酪氨酸固體;
2)DL-N-苯乙酰酪氨酸酶催化水解:在20~40℃和pH8~10條件下,0.1~0.5mol/L?DL-N-苯乙酰酪氨酸在固定化青霉素酰化酶催化下水解10~20h;固定化青霉素酰化酶與DL-N-苯乙酰酪氨酸的質量比為1:3~10,反應完成后,濃鹽酸調pH1~2,析出苯乙酸和D-N-苯乙酰酪氨酸;
3)D-酪氨酸制備:D-N-苯乙酰酪氨酸在3~8mol/L鹽酸水溶液中,溫度90~115℃下酸解3~15h,酸解液濃縮至鹽酸水溶液的1/5~1/10,用與濃縮液等體積的乙酸乙酯萃取苯乙酸三次,水相調pH5.6,冷凍析出D-酪氨酸。
2.根據權利要求1所述的D-酪氨酸制備方法,其特征是步驟(1)中DL-酪氨酸衍生為DL-N-苯乙酰酪氨酸的酰化劑為苯乙酸、苯乙酸甲酯、苯乙酰氯或苯乙酰溴。
3.?根據權利要求1所述的D-酪氨酸制備方法,其特征是步驟(3)中D-N-苯乙酰酪氨酸的酸解在氮氣保護下,采用3~8mol/L濃鹽酸,酸解溫度90~115℃,時間3~15h。
4.根據權利要求1所述的D-酪氨酸制備方法,其特征是步驟(3)中酸解液用活性炭脫色,脫色液用乙酸乙酯萃取,水相用無機堿如氨水、氫氧化鈉調pH至等電點5.6,0~5℃下,靜置過夜,抽濾后濾餅用少量去離子水洗滌,烘干得到D-酪氨酸。
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