[發明專利]煙曲霉半乳甘露聚糖抗原的提取與純化方法無效
| 申請號: | 201110289099.8 | 申請日: | 2011-09-29 |
| 公開(公告)號: | CN103030702A | 公開(公告)日: | 2013-04-10 |
| 發明(設計)人: | 史東東;何永勝;周澤奇;李寧;王東東;粟艷;彭潔 | 申請(專利權)人: | 天津貽諾琦生物工程有限公司 |
| 主分類號: | C08B37/00 | 分類號: | C08B37/00 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 300457 天津市經濟技術開發區洞*** | 國省代碼: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 曲霉 甘露 聚糖 抗原 提取 純化 方法 | ||
1.一種煙曲霉分泌型半乳甘露聚糖的制備與純化方法,包括以下步驟:
(a)煙曲霉菌液體培養液經過高壓滅菌處理后,過濾的方法除去菌體;
(b)向(a)步驟得到菌液上清中,加入無水乙醇或其他濃度的甲醇或乙醇溶液,產生沉淀,離心,沉淀用乙醇溶液洗滌,再用烘干或凍干等方法保存;
(c)步驟(b)所得沉淀用水或生理鹽水、PBS等能溶解多糖的溶液溶解,;
(d)向步驟(c)所得的溶液中,加入活性炭等脫色物質,或用脫色物質制成脫色柱,對GM粗提物溶液進行脫色;
(e)步驟(d)所得溶液經濾膜過濾后,用超濾管超濾,凍干,即為純化甘露聚糖。
2.如權利要求1所述方法,其特征在于,用濾膜過濾除去菌體,得到無菌體的培養液上清。
3.如權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(b)中,用乙醇或甲醇溶液處理煙曲霉培養液上清,得到半乳甘露聚糖粗提物。
4.如權利要求1所述方法,其特征在于,步驟(b)中,所用無水乙醇的體積為培養液上清體積的4倍。
5.如權利要求1所述方法,其特征在于,步驟(c)中,溶解沉淀用的溶劑為水或PBS,或生理鹽水等可溶解多糖的溶液。
6.如權利要求1所述方法,其特征在于,步驟(d)所使用脫色介質為活性炭,其形狀可為木炭、煤炭、骨炭等來源,可為粉末狀、顆粒狀、柱狀等不同形狀。脫色介質可為除活性炭外的其他脫色介質,如樹酯、活性白土等。
7.如權利要求1所述方法,其特征在于,步驟(e)中,所使用純化方法為超濾。
8.如權利要求1所述方法,其特征在于,步驟(e)中,所使用超濾裝置為離心超濾管,截留分子量可為100KD以下的任意分子量。
9.如權利要求1所述方法,其特征在于,步驟(a)和(e)中,溶液都使用0.22μm濾膜進行了過濾。
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