[發(fā)明專利]尿液診斷膀胱癌的方法和試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110287529.2
• 申請(qǐng)日: 2011-09-23
• 公開（公告）號(hào): CN102311953A
• 公開（公告）日: 2012-01-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 余堅(jiān);王紅陽;顧健人;楊勝利;趙仰星;孫晉楓;張紅宇;顧峻;王韋;何英華;郭士成
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海市腫瘤研究所
• 主分類號(hào): C12N15/11
• 分類號(hào): C12N15/11;C12Q1/68
• 代理公司: 上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 31100
• 代理人: 陳靜

1.一種分離的多核苷酸，其特征在于，包括：

SEQ?ID?NO：5所示核苷酸序列的多核苷酸；

SEQ?ID?NO：6所示核苷酸序列的多核苷酸；

SEQ?ID?NO：7所示核苷酸序列的多核苷酸；

SEQ?ID?NO：8所示核苷酸序列的多核苷酸；

SEQ?ID?NO：9所示核苷酸序列的多核苷酸；

SEQ?ID?NO：10所示核苷酸序列的多核苷酸；

SEQ?ID?NO：11所示核苷酸序列的多核苷酸；和/或

SEQ?ID?NO：12所示核苷酸序列的多核苷酸。

2.一種多核苷酸，其特征在于，其是權(quán)利要求1所述的多核苷酸經(jīng)過亞硫酸氫鹽或重亞硫酸氫鹽處理后獲得的多核苷酸。

3.如權(quán)利要求2所述的多核苷酸，其特征在于，包括：

SEQ?ID?NO：13所示核苷酸序列的多核苷酸；

SEQ?ID?NO：14所示核苷酸序列的多核苷酸；

SEQ?ID?NO：15所示核苷酸序列的多核苷酸；

SEQ?ID?NO：16所示核苷酸序列的多核苷酸；

SEQ?ID?NO：17所示核苷酸序列的多核苷酸；

SEQ?ID?NO：18所示核苷酸序列的多核苷酸；

SEQ?ID?NO：19所示核苷酸序列的多核苷酸；和/或

SEQ?ID?NO：20所示核苷酸序列的多核苷酸。

4.權(quán)利要求1-3任一所述的多核苷酸的用途，其特征在于，用于制備膀胱癌的檢測試劑或檢測試劑盒。

5.一種試劑或試劑組合，其特征在于，所述的試劑或試劑組合是引物對(duì)，所述引物對(duì)包括以下的至少一組：

(1)特異性擴(kuò)增SEQ?ID?NO：13所示核苷酸序列的多核苷酸的引物對(duì)；

(2)特異性擴(kuò)增SEQ?ID?NO：14所示核苷酸序列的多核苷酸的引物對(duì)；

(3)特異性擴(kuò)增SEQ?ID?NO：15所示核苷酸序列的多核苷酸的引物對(duì)；

(4)特異性擴(kuò)增SEQ?ID?NO：16所示核苷酸序列的多核苷酸的引物對(duì)；

(5)特異性擴(kuò)增SEQ?ID?NO：17所示核苷酸序列的多核苷酸的引物對(duì)；

(6)特異性擴(kuò)增SEQ?ID?NO：18所示核苷酸序列的多核苷酸的引物對(duì)；

(7)特異性擴(kuò)增SEQ?ID?NO：19所示核苷酸序列的多核苷酸的引物對(duì)；和/或

(8)特異性擴(kuò)增SEQ?ID?NO：20所示核苷酸序列的多核苷酸的引物對(duì)。

6.如權(quán)利要求5所述的試劑或試劑組合，其特征在于，

引物對(duì)(1)的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：21和SEQ?ID?NO：22所示；

引物對(duì)(2)的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：23和SEQ?ID?NO：24所示；

引物對(duì)(3)的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：25和SEQ?ID?NO：26所示；

引物對(duì)(4)的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：27和SEQ?ID?NO：28所示；

引物對(duì)(5)的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：29和SEQ?ID?NO：30所示；

引物對(duì)(6)的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：31和SEQ?ID?NO：32所示；

引物對(duì)(7)的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：33和SEQ?ID?NO：34所示；或

引物對(duì)(8)的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：35和SEQ?ID?NO：36所示。

7.權(quán)利要求5或6所述的試劑或試劑組合的用途，用于制備檢測膀胱癌的試劑盒。

8.一種檢測試劑盒，其特征在于，其包括：

容器，以及位于容器種的權(quán)利要求5或6所述的試劑或試劑組合。

9.一種體外檢測樣品中權(quán)利要求1所述的多核苷酸的甲基化譜式的方法，其特征在于，包括：

(a)提供尿液樣品，提取基因組DNA；

(b)利用亞硫酸氫鹽或重亞硫酸氫鹽處理步驟(a)所述的基因組DNA，從而基因組DNA中未甲基化的胞嘧啶轉(zhuǎn)化為尿嘧啶；

(c)分析經(jīng)步驟(b)處理的基因組DNA中是否存在權(quán)利要求2或3所述的多核苷酸；

若是存在權(quán)利要求2或3所述的多核苷酸，則表明該樣品存在多核苷酸的甲基化譜式異常。

10.如權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于，步驟(c)中，采用權(quán)利要求5或6所述的至少一組試劑，通過PCR擴(kuò)增的方式來確定基因組DNA中是否存在權(quán)利要求2或3所述的多核苷酸。