[發明專利]一種銀杏黃素或異銀杏黃素的提取方法

有效

• 申請號: 201110285372.X
• 申請日: 2011-09-13
• 公開（公告）號: CN102399207A
• 公開（公告）日: 2012-04-04
• 發明（設計）人: 吳彤;李燕;楊方;莊昌龍;姜仁吉;周海鳳;王鑫杰;張樂樂;樊曉
• 申請（專利權）人: 上海醫藥工業研究院
• 主分類號: C07D311/30
• 分類號: C07D311/30;C07D311/40
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司 31002
• 代理人: 薛琦;朱水平

技術領域

本發明涉及一種銀杏黃素或異銀杏黃素的提取方法。

背景技術

刺山柑Capparis?spinosa?L.為白花菜科Capparidaceae山柑屬Capparis植物，又名續隨子、水瓜鈕、野西瓜、馬檳榔，多年生藤本狀半蔓生灌木。喜生于干旱有沙石的低山坡、沙地上。原產于地中海沿岸。現常見于法國南部、意大利和阿爾及利亞等地區，我國新疆、西藏等地區亦有出產。刺山柑味辛苦，性溫，其根皮、葉和果實在維吾爾族民間有著廣泛的應用，用于治療風濕病，有祛風、散寒、除濕的作用。刺山柑的主要成分為蕓香甙、癸酸、阿魏酸、芥子酸、含18個碳的不飽和脂肪酸。迄今為止，尚未有文獻公開過關于從刺山柑中提取銀杏黃素或異銀杏黃素的報導。

現有技術中，銀杏黃素和異銀杏黃素通常從銀杏外種皮、銀杏葉或滿山香種子中分離提取。

潘竟先，張虎翼，楊憲斌等植物資源與環境1995，4(2)：17-21報導了從銀杏外種皮中提取銀杏黃素和異銀杏黃素的方法。該方法將銀杏外種皮930g粉碎后，用石油醚浸泡以除去極性小的成分，再用乙酸乙酯浸泡2次，每次3天，過濾，濃縮得乙酸乙酯提取物40g。經硅膠減壓柱層析用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和甲醇洗脫，得4部分。其中乙酸乙酯部分6.8g經聚酰胺柱層析，二氯甲烷-甲醇梯度洗脫，得到01～12樣品。07有231.5mg，其中50mg經制備薄層層析(PTLC)，展開劑：二氯甲烷∶甲醇(96∶4)，展開4次得銀杏黃素3.3mg，異銀杏黃素27.3mg。

唐于平，樓鳳昌，王景華，李延芳中國藥學雜志2001，36(4)：231-233報導了從銀杏葉中提取銀杏黃素和異銀杏黃素的方法。該方法將干燥銀杏葉10.0kg粉碎，以95％乙醇回流提取3次。提取液合并，減壓濃縮，與硅燥土拌樣后，置索式提取器中，依次用石油醚、乙酸乙酯、甲醇回流提取。乙酸乙酯提取物經硅膠柱(硅膠粒度：200～300目)反復層析，氯仿-甲醇(100∶1～100∶100)梯度洗脫，得到化合物I～VII的粗品，再用SephadexLH-20柱層析(用純甲醇洗脫)進行純化，分別得到化合物I(50mg)，II(16mg)，III(10mg)，IV(10mg)，V(800mg)，銀杏黃素VI(100mg)，異銀杏黃素VII(40mg)的純品。

李俊，李甫，陸園園等廣西植物2006，26(5)：690-691報導了從滿山香種子中提取銀杏黃素的方法。該方法將滿山香種子2kg粉碎，用75％乙醇10L回流提取3次，每次2h，合并提取液，減壓濃縮得粗提物268g。將該提取物用水混懸后依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇各萃取3次，回收溶劑后得乙酸乙酯萃取物48g。將乙酸乙酯萃取物經硅膠柱層析，以氯仿-甲醇(體積比100∶0～50∶50)進行梯度洗脫。將95∶5洗脫部分合并，經反復硅膠柱層析、SephadexLH-20柱層析和硅膠制備薄層層析分離得銀杏黃素32mg。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供了一種與現有技術完全不同的銀杏黃素或異銀杏黃素的提取方法。本發明的提取方法的原料與現有技術完全不同。

本發明涉及一種銀杏黃素的提取方法，其包含下列步驟：

(1)將刺山柑果實的水提醇沉液過濾，濃縮，得浸膏；

(2)將步驟(1)得到的浸膏溶于水，依次用石油醚和氯仿萃取，得到氯仿部位；

(3)將步驟(2)所得的氯仿部位用聚酰胺柱進行梯度洗脫，洗脫劑依次為水和體積百分比為30％～95％的乙醇水溶液，收集以硅膠薄層層析法檢測，展開劑氯仿和甲醇的體積比為8∶1時，Rf值為0.5～0.8的餾分；

(4)將步驟(3)所得物質用凝膠柱進行洗脫，收集以硅膠薄層層析法檢測，展開劑氯仿和甲醇的體積比為8∶1時，Rf值為0.6～0.8的餾分；

(5)將步驟(4)所得物質進行硅膠柱層析分離，或者硅膠制備薄層層析分離，收集以硅膠薄層層析法檢測，展開劑為體積比為15∶1的氯仿和甲醇時，Rf值為0.45的餾分；

(6)將步驟(5)所得物質進行制備液相分離，收集以下檢測條件下檢測到的組分：柱溫為25～30℃，Waters510泵，Waters484檢測器，Global-C18柱子，檢測波長270nm，流動相為甲醇與水的混合液，二者體積比為90∶10，流速為3.40ml/min，保留時間為24.7min，即得銀杏黃素。