[發明專利]一種銀杏黃素或異銀杏黃素的提取方法

有效

• 申請號: 201110285372.X
• 申請日: 2011-09-13
• 公開（公告）號: CN102399207A
• 公開（公告）日: 2012-04-04
• 發明（設計）人: 吳彤;李燕;楊方;莊昌龍;姜仁吉;周海鳳;王鑫杰;張樂樂;樊曉
• 申請（專利權）人: 上海醫藥工業研究院
• 主分類號: C07D311/30
• 分類號: C07D311/30;C07D311/40
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司 31002
• 代理人: 薛琦;朱水平

1.一種銀杏黃素的提取方法，其包含下列步驟：

(1)將刺山柑果實的水提醇沉液過濾，濃縮，得浸膏；

(2)將步驟(1)得到的浸膏溶于水，依次用石油醚和氯仿萃取，得到氯仿部位；

(3)將步驟(2)所得的氯仿部位用聚酰胺柱進行梯度洗脫，洗脫劑依次為水和體積百分比為30％～95％的乙醇水溶液，收集以硅膠薄層層析法檢測，展開劑氯仿和甲醇的體積比為8∶1時，Rf值為0.5～0.8的餾分；

(4)將步驟(3)所得物質用凝膠柱進行洗脫，收集以硅膠薄層層析法檢測，展開劑氯仿和甲醇的體積比為8∶1時，Rf值為0.6～0.8的餾分；

(5)將步驟(4)所得物質進行硅膠柱層析分離，或者硅膠制備薄層層析分離，收集以硅膠薄層層析法檢測，展開劑為體積比為15∶1的氯仿和甲醇時，Rf值為0.45的餾分；

(6)將步驟(5)所得物質進行制備液相分離，收集以下檢測條件下檢測到的組分：柱溫為25～30℃，Waters510泵，Waters484檢測器，Global-C18柱子，檢測波長270nm，流動相為甲醇與水的混合液，二者體積比為90∶10，流速為3.40ml/min，保留時間為24.7min，即得銀杏黃素。

2.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于：步驟(1)中，所述的刺山柑果實為干燥的果實；所述的刺山柑果實粉碎后使用，粉碎后的粒徑為3～7目。

3.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于：步驟(1)中，所述的水提醇沉液由下列方法制得：將刺山柑果實用水提取，過濾，將濾液濃縮，加入乙醇水溶液，靜置，即可；所述水的體積為刺山柑干燥果實體積的8～10倍，用水提取的次數為2～3次，用水提取的時間為每次1～2小時；所述的濃縮后濾液的密度為1.0～2.0g/ml；所述的加入乙醇水溶液后溶液中的乙醇的濃度為體積百分比65～85％。

4.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于：步驟(2)中，所述的水的用量為步驟(1)得到的浸膏體積的10～15倍；所述的石油醚的用量為步驟(1)得到的浸膏體積的10～15倍；所述的氯仿的用量為步驟(1)得到的浸膏體積的15～20倍；所述的用石油醚萃取的次數為2～3次；所述的用氯仿萃取的次數為3～4次。

5.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于：步驟(3)中，所述的聚酰胺柱的規格為14-30目、30-60目、60-100目、100-120目或200-400目，所述的聚酰胺柱中的聚酰胺填料與上柱物質的重量比為50∶1～80∶1；所述的梯度洗脫的洗脫劑為：水→30％乙醇水溶液→50％乙醇水溶液→70％乙醇水溶液→90％乙醇水溶液，以上均為體積百分比，所述的梯度洗脫中，水的用量為聚酰胺柱體積的3～5倍，30％乙醇水溶液的用量為聚酰胺柱體積的4～6倍，50％乙醇水溶液的用量為聚酰胺柱體積的4～6倍，70％乙醇水溶液的用量為聚酰胺柱體積的4～6倍，90％乙醇水溶液的用量為聚酰胺柱體積的4～6倍。

6.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于：步驟(4)中，所述的凝膠柱為Sephadex?LH20；所述的用凝膠柱進行洗脫的洗脫劑為甲醇，洗脫劑的用量為凝膠柱體積的1～2倍。

7.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于：步驟(5)包含下列步驟：(1’)將步驟(4)所得物質進行硅膠柱層析分離，收集以硅膠薄層層析法檢測，展開劑氯仿和甲醇的體積比為15∶1時，Rf值為0.3～0.5的餾分；(2’)將步驟(1’)所得物質進行硅膠柱層析分離，或者硅膠制備薄層層析分離，收集以硅膠薄層層析法檢測，展開劑為體積比為15∶1的氯仿和甲醇時，Rf值為0.45的餾分。

8.如權利要求7所述的制備方法，其特征在于：步驟(1’)中，所述的硅膠柱層析分離中，硅膠的粒度為100～200目；硅膠與上柱物質的重量比為50∶1～80∶1；洗脫劑為石油醚和乙酸乙酯的混合溶劑或正己烷與乙酸乙酯的混合溶劑；當洗脫劑為石油醚和乙酸乙酯的混合溶劑時，石油醚和乙酸乙酯的體積比為6∶1～1∶1；洗脫方法為梯度洗脫，當洗脫劑為石油醚和乙酸乙酯的混合溶劑時，梯度為石油醚∶乙酸乙酯＝6∶1→4∶1→2∶1→1∶1，每個梯度的洗脫劑用量為硅膠柱體積的4～6倍。