[發(fā)明專利]一條編碼ADI的優(yōu)化DNA分子及表達ADI的工程菌

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110282842.7
• 申請日: 2011-09-22
• 公開（公告）號: CN102321643A
• 公開（公告）日: 2012-01-18
• 發(fā)明（設計）人: 侯建華;楊璐
• 申請（專利權）人: 北京凱因科技股份有限公司
• 主分類號: C12N15/55
• 分類號: C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12N9/80;C12R1/19
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一條編碼精氨酸脫亞胺酶的優(yōu)化DNA分子，其核苷酸序列如SEQ?ID?No：1所示。

2.一種表達載體pET-30a-ADI，其特征是所述表達載體含有權利要求1所述的優(yōu)化的DNA分子序列。

3.含有權利要求2所述表達載體的大腸埃希氏工程菌pET-30a-adi/BL21(DE3)，其保藏編號為CGMCC?No.5159。

4.權利要求1所述優(yōu)化DNA分子在生產精氨酸脫亞胺酶中的應用。

5.權利要求2所述的表達載體在生產精氨酸脫亞胺酶中的應用。

6.權利要求3所述的工程菌在生產精氨酸脫亞胺酶中的應用。

7.一種精氨酸脫亞胺酶的制備方法，包括：選取工程菌菌株pET-30a-adi/BL21(DE3)，轉至LB培養(yǎng)基中，發(fā)酵培養(yǎng)，將所得發(fā)酵液經破菌、包涵體洗滌以及抽提、復性和精制步驟，得到目的蛋白精氨酸脫亞胺酶。

8.根據(jù)權利要求7所述的方法，其特征在于，所述發(fā)酵培養(yǎng)步驟中，在培養(yǎng)物中加入誘導劑IPTG后進行誘導表達，所述破菌為超聲破菌。

9.根據(jù)權利要求7所述的方法，其特征在于，所述精制步驟是采用柱層析精制。

10.權利要求9所述的方法，其中所用柱層析為離子交換柱或分子篩中的任意一種或組合。