[發明專利]一種基于棉線的通用型電化學免疫傳感器的制備及應用

無效

• 申請號: 201110279484.4
• 申請日: 2011-09-20
• 公開（公告）號: CN102426247A
• 公開（公告）日: 2012-04-25
• 發明（設計）人: 王利兵;胥傳來;吳曉玲
• 申請（專利權）人: 王利兵;胥傳來;吳曉玲
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N27/48;G01N27/06
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所 32104
• 代理人: 時旭丹;劉品超

技術領域

本發明涉及的是一種基于棉線的通用型電化學免疫傳感器的制備及應用，同時還涉及了該檢測方法對血清蛋白檢測的通用性。屬于電化學免疫檢測技術領域。

背景技術

納米材料由于其尺寸很小，結構特殊，因此具有許多新的物理化學特性，如小尺寸效應，大的比表面，極高的反應活性，量子效應等。基于納米材料的自身的特性，建立相應的具有檢測速度快,靈敏度高的檢測方法的研究日益成為研究重點。碳納米管自1991年被日本科學家Ijima發現以來，由于其特有的結構特點及導電性能，一直受到人們的高度重視，基于碳納米管的傳感器的研制也曾出不窮。但由于制備成本高，使用方法難度高等原因，生物兼容性差，限制了研發的傳感器的實際推廣應用。為了克服上述的缺點，研發經濟易于推廣應用的基于棉線的電化學免疫傳感器，本發明首次以棉線及紡織布料為材料，利用碳納米管對棉線進行dip-dry包裹，在包裹的過程中加入人血清白蛋白HSA的抗體，制備可以監測人血清白蛋白的快速高靈敏傳感器，同時本發明還制備了通用型的基于棉線的電化學免疫傳感器，可監測各種血清蛋白。特別是建立的傳感器是基于可編織成相應的紡織服裝的棉線，為以后日常生活中簡單、便捷及隨時隨地監測提供了可能。

發明內容

本發明的目的是制備一種能夠快速，高靈敏地檢測血清中白蛋白的棉線免疫傳感器。

本發明的目的之二是建立基于制備的人血清白蛋白傳感器的快速，高靈敏的檢測方法及技術指標。

本發明的目的之三是在發明目的一、二的基礎之上,建立通用型棉線免疫傳感器的制備及檢測技術。

本發明的技術方案：

1.?監控人血清白蛋白?(HSA)?的電化學棉線傳感器的制備方法，制備步驟為：

（1）碳納米管聚苯乙烯磺酸鈉溶液的制備：將聚苯乙烯磺酸鈉PSS分散于水溶液中得到質量濃度為5%-15%?的PSS溶液；將水溶性碳納米管分散于PSS溶液中，得到濃度為40-70?mg/mL的碳納米管PSS溶液；超聲過夜處理；

（2）將一定濃度的HSA抗體溶液，加入到上述制備的碳納米管PSS溶液中，得到HSA抗體終濃度5-25μg/mL的HSA抗體-碳納米管PSS溶液；

（3）將長度為5cm的棉線浸入到HSA抗體-碳納米管PSS溶液中，并放置30min后取出，4-25℃下低溫干燥，定義該操作為一個循環；再次將干燥的棉線放入到HSA抗體-碳納米管PSS溶液中一段時間后取出，干燥；反復循環操作10-20次后，干燥后4℃保存待用，即制備得到碳納米管棉線復合物傳感器，用于監測HSA。

2、建立基于所述方法制備的監測HSA的電化學傳感器的循環伏安檢測方法，步驟是：

（1）以所制備的監測HSA電化學棉線傳感器為工作電極，Pt電極為對電極，飽和甘汞電極Hg/Hg₂Cl₂為參比電極，在電化學工作站的控制下，進行循環伏安法測量，紀錄電流對電位的變化曲線，即I-E曲線；

（2）逐次向體系中加入終濃度為11.9?nmol/L，119?nmol/L，1.19?μmol/L，11.9?μmol/L?HSA的標準系列溶液，分別紀錄每次的I-E曲線；

（3）以每次記錄的I-E曲線中0.5?V所對應的電流值為標準，尋找電流-HSA濃度之間的對應的關系，建立檢測HSA的電流-HSA濃度標準曲線；

（4）在相同的條件下，檢測樣品液的電流值，與所建立的電流-HSA濃度標準曲線對照，確定檢測樣品液中的HSA的含量。

3、建立基于所述方法制備的監測HSA的電化學棉線傳感器的電阻檢測方法，步驟是：

（1）以所制備的監測HSA電化學棉線傳感器為對象，測量其電阻；

（2）逐次向體系中加入終濃度為11.9?nmol/L，119?nmol/L，1.19?μmol/L，11.9?μmol/L?HSA的標準系列溶液，分別測量每次的電阻值；

（3）以所測量的電阻值為標準，建立電阻值-HSA濃度的標準曲線；

（4）在相同的條件下，檢測樣品液的電阻值，與所建立的電阻值-HSA濃度標準曲線對照，確定檢測樣品液中的HSA的含量。

4、通過更換傳感器制備中使用抗體的種類，建立一種基于棉線的通用型電化學免疫傳感器的制備及檢測方法，其步驟是：

按照步驟1中所述人血清白蛋白棉線傳感器的制備方法，通過用相應的血清蛋白抗體更換HSA抗體，在相同的制備方法的條件下，制備針對對應血清蛋白監測用的通用型電化學棉線免疫傳感器。