[發明專利]一種基于棉線的通用型電化學免疫傳感器的制備及應用

無效

• 申請號: 201110279484.4
• 申請日: 2011-09-20
• 公開（公告）號: CN102426247A
• 公開（公告）日: 2012-04-25
• 發明（設計）人: 王利兵;胥傳來;吳曉玲
• 申請（專利權）人: 王利兵;胥傳來;吳曉玲
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N27/48;G01N27/06
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所 32104
• 代理人: 時旭丹;劉品超

1.一種監測人血清白蛋白的電化學棉線傳感器的制備方法，其特征在于制備步驟為：

（1）碳納米管聚苯乙烯磺酸鈉溶液的制備：將聚苯乙烯磺酸鈉PSS分散于水溶液中得到質量濃度為5%-15%的PSS溶液；將水溶性碳納米管分散于PSS溶液中，得到濃度為40-70?mg/mL的碳納米管PSS溶液；超聲過夜處理；

（2）將一定濃度的人血清白蛋白HSA抗體溶液，加入到上述制備的碳納米管PSS溶液中，得到HSA抗體終濃度5-25μg/mL的HSA抗體-碳納米管PSS溶液；

（3）將長度為5cm的棉線浸入到HSA抗體-碳納米管PSS溶液中，并放置30min后取出，4-25℃下低溫干燥，定義該操作為一個循環；再次將該干燥的棉線放入到HSA抗體-碳納米管PSS溶液中30min后取出，干燥；反復循環操作10-20次后，干燥后4℃保存待用，即制備得到碳納米管棉線復合物傳感器，用于監測HSA。

2.權利要求1所述方法制備的監測HSA的電化學棉線傳感器的循環伏安檢測方法，其特征在于：

（1）以所制備的監測HSA電化學棉線傳感器為工作電極，Pt電極為對電極，飽和甘汞電極Hg/Hg₂Cl₂為參比電極，在電化學工作站的控制下，進行循環伏安法測量，紀錄電流對電位的變化曲線，即I-E曲線；

（2）逐次向體系中加入終濃度為11.9?nmol/L，119?nmol/L，1.19?μmol/L，11.9?μmol/L?HSA的標準系列溶液，分別紀錄每次的I-E曲線；

（3）以每次記錄的I-E曲線中0.5?V所對應的電流值為標準，尋找電流-HSA濃度之間的對應的關系，建立監測HSA的電流-HSA濃度標準曲線；

（4）在相同的條件下，檢測樣品液的電流值，與所建立的電流-HSA濃度標準曲線對照，確定檢測樣品液中的HSA的含量。

3.權利要求1所述方法制備的監測HAS的電化學棉線傳感器的電阻檢測方法，其特征在于：

（1）以所制備的監測HSA電化學棉線傳感器為對象，測量其電阻；

（2）逐次向體系中加入終濃度為11.9?nmol/L，119?nmol/L，1.19?μmol/L，11.9?μmol/L?HSA的標準系列溶液，分別測量每次的電阻值；

（3）以所測量的電阻值為標準，建立電阻值-HSA濃度的標準曲線；

（4）在相同的條件下，檢測樣品液的電阻值，與所建立的電阻值-HSA濃度標準曲線對照，確定檢測樣品液中的HSA的含量。

4.一種基于棉線的通用型電化學免疫傳感器的制備方法，其特征在于更換權利要求1步驟（2）中使用抗體的種類，按照權利要求1監測人血清白蛋白電化學棉線傳感器的制備方法相同的條件，制備針對對應血清蛋白監測用的通用型電化學棉線免疫傳感器。

5.用權利要求4所述方法制備的基于棉線的通用型電化學免疫傳感器的檢測方法，其特征在于，以所制備的通用型電化學免疫傳感器為工作電極，按照權利要求2和3?HSA電化學棉線傳感器的檢測方法，建立相應的電流曲線或測量相應的電阻值；檢測樣品液的電流值或電阻值，與標準曲線對照，測得樣品液中的對應血清蛋白含量；

所述棉線的通用型電化學免疫傳感器檢測的目標蛋白為γ球蛋白，α1球蛋白，α2球蛋白，或β球蛋白。