[發(fā)明專利]一種基于氫核磁共振-模式識(shí)別技術(shù)對椰島鹿龜酒的檢測方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110277719.6
• 申請日: 2011-09-19
• 公開（公告）號: CN102375000A
• 公開（公告）日: 2012-03-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃靜;張琦;冉堅(jiān);雷羽;王霞;蘭余;藺恒;馬小花
• 申請（專利權(quán)）人: 海南椰島(集團(tuán))股份有限公司
• 主分類號: G01N24/08
• 分類號: G01N24/08
• 代理公司: 北京億騰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所 11309
• 代理人: 陳惠蓮

1.一種基于氫核磁共振-模式識(shí)別技術(shù)對椰島鹿龜酒的檢測方法，該方法步驟如下：

A：標(biāo)準(zhǔn)樣品和測試樣品的圖譜處理及數(shù)據(jù)采集：

(1)樣品的制備：量取樣品，取量范圍為10mL-30mL，在40℃-80℃溫度條件下減壓蒸干，殘?jiān)屑尤爰兯芙猓兯昧繛?0mL-25mL，溶解液用水飽和的正丁醇萃取，正丁醇用量為5-20mL，吸取有機(jī)層液體，取量為2mL-10mL，在40℃-80℃溫度下減壓蒸干，加入0.5mL?D₂O溶解后，用0.45μm的微孔濾膜過濾，濾液置于直徑5mm核磁管中，用于¹H-NMR檢測；

(2)¹H-NMR譜的分析測試：將步驟(1)中獲得的各樣品在400MHz核磁儀上，以恒溫在292K，以D₂O作為內(nèi)鎖，掃描16-64次，譜寬為-1500Hz-8000Hz，采樣時(shí)間為3.73s，脈沖間隔為0.00-3.00s，采用標(biāo)準(zhǔn)的預(yù)飽和脈沖序列(zgpr)壓制水峰信號的條件進(jìn)行測定，即獲得各樣品的¹H-NMR譜；

(3)圖譜處理及數(shù)據(jù)采集方法：將步驟(2)中測定獲得的各樣品¹H-NMR圖譜，每張圖譜按0.02-0.07化學(xué)位移值單位進(jìn)行分段，分段積分，并將積分值進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理，即得到每個(gè)樣本的各化學(xué)位移值段與相對應(yīng)的信號峰面積積分值的數(shù)據(jù)矩陣；

B：標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)庫模型的建立

采用椰島鹿龜酒合格樣品作為標(biāo)準(zhǔn)樣品(由椰島鹿龜酒酒廠于2007年至2009年期間生產(chǎn)的椰島鹿龜酒)，采用如上A步驟的樣品處理、¹H-NMR譜的分析測試以及圖譜處理及數(shù)據(jù)采集方法，獲得椰島鹿龜酒合格樣品的數(shù)據(jù)矩陣，對該數(shù)據(jù)矩陣進(jìn)行偏最小二乘法判別(PLS-DA)分析，即得到椰島鹿龜酒合格樣品數(shù)據(jù)庫模型；

C：采用缺味椰島鹿龜酒樣品(其缺當(dāng)歸、梔子、鹿茸、鹿骨膠、龜板膠)或者市場上購買的仿制椰島鹿龜酒產(chǎn)品作為待測試樣品，同樣采用如上A步驟的樣品處理、¹H-NMR譜的分析測試以及圖譜處理及數(shù)據(jù)采集方法，獲得缺味椰島鹿龜酒樣品或仿制鹿龜酒樣品的數(shù)據(jù)矩陣，將其導(dǎo)入上述B獲得的椰島鹿龜酒合格樣品數(shù)據(jù)庫模型中，通過與標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)庫模型的數(shù)據(jù)點(diǎn)在圖中的分布對比，即可定性鑒別缺味椰島鹿龜酒樣品或仿制椰島鹿龜酒樣品是否與椰島鹿龜酒合格品一致；

所述椰島鹿龜酒合格樣品主要由下述原料組成：當(dāng)歸、白術(shù)、黨參、梔子、砂仁、肉桂、熟地、黃精、制首烏、制川芎、鹿茸、鹿骨膠和龜板膠。

2.根據(jù)權(quán)利要求1的檢測方法，其特征在于：在該方法中采用與B步驟中的標(biāo)準(zhǔn)樣品不同批次的、但同樣由椰島鹿龜酒酒廠生產(chǎn)的椰島鹿龜酒作為椰島鹿龜酒驗(yàn)證樣品，采用步驟A獲得相應(yīng)的驗(yàn)證樣品的數(shù)據(jù)矩陣，將其導(dǎo)入方法B所建立的椰島鹿龜酒標(biāo)準(zhǔn)樣品模型圖中，來分析驗(yàn)證樣品的數(shù)據(jù)點(diǎn)是否與椰島鹿龜酒標(biāo)準(zhǔn)樣品的數(shù)據(jù)點(diǎn)聚在了一起，以此驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)樣品與驗(yàn)證樣品在化學(xué)成分上差異較小，產(chǎn)品質(zhì)量合格。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的檢測方法，其中在步驟A的(2)中，以D₂O作為內(nèi)鎖掃描32次，脈沖間隔為2.00s。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的檢測方法，其中在步驟A的(3)中，每張圖譜按0.05化學(xué)位移值單位進(jìn)行分段。