[發(fā)明專利]一種適用于分析復雜基質(zhì)固體樣品中雌激素及雙酚A的前處理方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110273078.7
• 申請日: 2011-09-15
• 公開（公告）號: CN102435681A
• 公開（公告）日: 2012-05-02
• 發(fā)明（設計）人: 史江紅;陳慶彩;吳唯;劉曉薇;張暉
• 申請（專利權(quán)）人: 北京師范大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種適用于分析復雜基質(zhì)固體樣品中雌激素及雙酚A的前處理方法，其特征在于：

該方法包括如下步驟：

(1)樣品提取

將采集的污泥和沉積物樣品進行冷凍干燥，以丙酮/甲醇＝1∶1(v/v)為萃取劑，用快速溶劑萃取提取固體樣品中的雌激素及雙酚A；然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至1ml左右，用氮氣吹干。

(2)提取液凈化

a.液液萃取(LLE)凈化：用乙腈重新溶解殘渣后，再加入正己烷漩渦混合，液液萃取去除非極性物質(zhì)，重復兩次棄去正己烷相，并將乙腈相氮氣吹干。

b.Florisil柱凈化：用正己烷/二氯甲烷＝3/1(v/v)溶液重新溶解上述凈化殘渣，然后通過預先用正己烷活化好的Florisil柱，再用正己烷/二氯甲烷＝3/1(v/v)淋洗，以丙酮/二氯甲烷＝2/8(v/v)為洗脫劑經(jīng)行洗脫，洗脫液氮氣吹干。

c.堿液凈化(AAE)+HLB柱凈化：用0.1M的NaOH溶液超聲溶解Florisil凈化后的殘渣，然后通過0.22μm的尼龍濾頭，濾液與100ml超純水和6ml甲醇混勻后，用4mol/L的鹽酸調(diào)節(jié)pH至3左右，并通過HLB柱富集凈化，HLB柱經(jīng)過乙酸乙酯洗脫后，洗脫液經(jīng)氮氣吹干后定容，待測定。

(3)利用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀分析雌激素及雙酚A濃度

色譜柱：Nova-Pak?C18，3.9mm×150mm×4μm，Waters公司；

離子源：電噴霧離子化源(ESI)，負離子方式檢測；離子噴射電壓：-4500V；溫度：450℃；源內(nèi)氣體1(GS1)，N₂，壓力：45psi；氣體2(GS2)，N₂，壓力：45psi；氣簾氣體N₂壓力：20psi；掃描方式為多重反應監(jiān)測(MRM)；碰撞氣N₂壓力：Medium。

HPLC流動相梯度洗脫條件為：

(4)標準曲線的繪制，以外標法進行定量測定

所述的外標法標準曲線的繪制：利用分析天平準確稱量3種雌激素及雙酚A，溶于色譜純乙腈內(nèi)，配置成系列濃度的標準溶液，采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用進行分析，分別以濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標進行回歸，得到標準曲線，用于計算樣品中分析物的量。

(5)樣品的測定

采集待測污泥和沉積物樣品，按步驟(1)對樣品進行提取，再按步驟(2)進行四步凈化，最后樣品用于液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用檢測，并與步驟(4)得到的標準曲線比較，通過換算最終得到待測樣品中雌激素及雙酚A的含量。

2.如權(quán)利要求1所述的一種適用于分析復雜基質(zhì)固體樣品中雌激素及雙酚A的前處理方法，其特征在于，所述的雌激素包括天然雌激素雌酮、17β-雌二醇、雌三醇和合成雌激素17α-乙炔基雌二醇。

3.如權(quán)利要求1所述的一種適用于分析復雜基質(zhì)固體樣品中雌激素及雙酚A的前處理方法，其特征在于，步驟(1)中快速溶劑萃取的溫度為60℃，壓力為1500pis，靜態(tài)提取2次，各8min。