[發(fā)明專利]一種細胞色素C的純化工藝

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110268301.9
• 申請日: 2011-09-13
• 公開（公告）號: CN102295699A
• 公開（公告）日: 2011-12-28
• 發(fā)明（設計）人: 王超展;樊花;陳湘琴
• 申請（專利權）人: 西北大學
• 主分類號: C07K14/80
• 分類號: C07K14/80;C07K1/20
• 代理公司: 西安西達專利代理有限責任公司 61202
• 代理人: 謝鋼

1.一種細胞色素C的純化工藝，包括以下步驟：

（1）從動物臟器或者酵母中提取得到細胞色素C的粗提液；

（2）向粗提液中加入無機鹽進行鹽析，靜置離心棄去沉淀的雜蛋白，收集上清液；

（3）加緩沖液調節(jié)上清液中無機鹽濃度至20%?~?35%，再用前沿疏水色譜法對其進行純化，即將所得溶液連續(xù)上樣于預先用20%?~?35%的無機鹽溶液平衡過的疏水色譜柱中，收集穿透液；

（4）用20%?~?35%無機鹽溶液沖洗色譜柱至吸光度達到穩(wěn)定，收集色譜流出液，與穿透液合并，即為純化后的細胞色素C。

2.根據權利要求1所述的細胞色素C的純化工藝，其特征在于：步驟（1）中，用pH值3?~?5的稀硫酸溶液進行提取，然后用稀氨水調節(jié)pH至6?~?8。

3.根據權利要求1所述的細胞色素C的純化工藝，其特征在于：所述動物臟器是豬、牛、羊、馬或狗的心臟、肝臟、腎臟。

4.根據權利要求1所述的細胞色素C的純化工藝，其特征在于：所述的無機鹽是堿金屬、堿土金屬或NH₄⁺的磷酸鹽、硫酸鹽、鹽酸鹽、醋酸鹽、檸檬酸鹽。

5.根據權利要求1所述的細胞色素C的純化工藝，其特征在于：步驟（2）中，加入無機鹽后的無機鹽終濃度為35%?~?70%。

6.根據權利要求1所述的細胞色素C的純化工藝，其特征在于：步驟（3）中，緩沖液為磷酸鹽緩沖液、Tris緩沖液、HEPES緩沖液、TES緩沖液、BES緩沖液或MOPS緩沖液。

7.根據權利要求1所述的細胞色素C的純化工藝，其特征在于：疏水色譜柱中填料是以硅膠、有機高分子聚合物或多糖聚合物為基質，以苯基、醚基、C1?~?C4烷基、鄰二醇基為配基。