[發(fā)明專利]一種提取純化溝果非洲砂仁素A的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110263981.5
• 申請日: 2011-09-08
• 公開（公告）號: CN102311409A
• 公開（公告）日: 2012-01-11
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉東鋒;郭琴
• 申請（專利權(quán)）人: 南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號: C07D303/40
• 分類號: C07D303/40;C07D301/32
• 代理公司: 暫無信息
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技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于天然藥物領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及一種提取純化溝果非洲砂仁素A的方法。

背景技術(shù)

溝果非洲砂仁素A（Aulacocarpin?A），是一種二萜類化合物，分子式：C₂₁H₃₂O₅，分子量：364.48，為無色棱晶，mp.102-103℃，CAS號：157878-18-7。主要存在于姜科（Zingiberaceae）植物溝果非洲砂仁的種子中，含量較高，其分子結(jié)構(gòu)式如下：

現(xiàn)代藥理研究表明，溝果非洲砂仁素A具有抗菌活性，其對枯草桿菌最低抑菌濃度為25μg/ml，對米黑毛霉最低抑菌濃度為50μg/ml。

經(jīng)文獻檢索，尚無適用于高純度溝果非洲砂仁素A的提取純化方法報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種適用于規(guī)?；a(chǎn)、產(chǎn)品純度高的提取純化溝果非洲砂仁素A的方法。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

一種提取純化溝果非洲砂仁素A的方法，其特征在于按如下工藝步驟進行：

A.脫脂：取溝果非洲砂仁種子，加入2-3倍量的石油醚超聲脫脂20-45分鐘，過濾，揮去殘留的石油醚；

B.提?。簩⒚撝蟮臏瞎侵奚叭仕幉募尤?-8倍量體積百分比為70-95%的乙醇溶液，加熱回流提取0.5-3小時，提取2次，過濾，合并兩次提取液，濃縮得到含有溝果非洲砂仁素A的濃縮液；

C.大孔樹脂柱層析：將所得濃縮液通過D101大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用90-95%乙醇洗脫，收集90-95%乙醇洗脫液，濃縮得浸膏；

D.硅膠柱層析：將所得浸膏與100-200目硅膠按重量比1:1-2拌勻，陰干；再取4-5倍的新鮮硅膠裝于柱底，拌樣硅膠裝于其上，以正己烷-丙酮混合溶液進行梯度洗脫，按體積比由高到低，依次按100-5:1洗脫劑比例進行洗脫，收集含溝果非洲砂仁素A的洗脫液，回收試劑，得到溝果非洲砂仁素A濃縮液；

E.結(jié)晶：將溝果非洲砂仁素A濃縮液置于結(jié)晶罐中靜置12-24小時使其結(jié)晶，過濾，濾出晶體，再采用兩相溶劑進一步純化得到純度達98%的無色棱狀結(jié)晶產(chǎn)品，所用結(jié)晶溶劑為石油醚-丙酮、二氯甲烷-乙酸乙酯或正己烷-二氯甲烷組合中的任意一種。

步驟D所述硅膠層析柱徑高比為1:3-5。

本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明先進行脫脂處理，再采用乙醇回流提取，通過大孔樹脂柱富集、短程柱層析后進行結(jié)晶，從而獲得含量98%以上的溝果非洲砂仁素A；本發(fā)明步驟少、得率高、操作簡便，易于規(guī)?；a(chǎn)，所用試劑正己烷、丙酮等，可替代通常柱層析采用的氯仿、甲醇，降低毒性和污染。

具體實施方式

實施例1：

取溝果非洲砂仁種子粗粉500g，用石油醚1000ml超聲脫脂30分鐘，過濾，揮去殘留的石油醚，用體積百分比為80%的乙醇溶液2500ml加熱回流提取2小時，過濾，藥渣再加2000ml80%乙醇溶液提取1.5小時，過濾，合并兩次提取液，濃縮得到含有溝果非洲砂仁素A的濃縮液；將所得濃縮液通過D101大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用95%乙醇洗脫，收集95%乙醇洗脫液，濃縮得到浸膏；將所得浸膏與100-200目的硅膠按重量比1:1拌勻、陰干，再取4倍新鮮硅膠裝于柱底，拌樣硅膠裝于其上，用正己烷-丙酮混合溶劑由高到低，依次按100:1、50:1、20:1、5:1體積比進行洗脫，收集含溝果非洲砂仁素A的洗脫液，回收試劑，將所得溝果非洲砂仁素A濃縮液置于結(jié)晶罐中靜置20小時使其結(jié)晶，過濾，濾出晶體，采用石油醚-丙酮（4:1）進一步純化得到無色棱狀結(jié)晶產(chǎn)品1.0g，純度為98.8%。

實施例2：