[發明專利]七帶石斑魚精子冷凍保存和應用方法無效
| 申請號： | 201110261862.6 | 申請日： | 2011-09-06 |
| 公開（公告）號： | CN102273439A | 公開（公告）日： | 2011-12-14 |
| 發明（設計）人： | 田永勝;齊文山;陳松林;翟介明;汪娣 | 申請（專利權）人： | 中國水產科學研究院黃海水產研究所 |
| 主分類號： | A01N1/02 | 分類號： | A01N1/02;A01K61/00 |
| 代理公司： | 北京中偉智信專利商標代理事務所 11325 | 代理人： | 張岱 |
| 地址： | 266071 山*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 石斑魚 精子 冷凍 保存 應用 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種七帶石斑魚精子冷凍保存方法，包括：七帶石斑魚精子采集和檢測、精子稀釋液配制、冷凍保存液配制、精子與冷凍保存液混合、平衡和冷凍保存，其特征在于：
所述的七帶石斑魚精子采集和檢測：精子活力在70-80％；
所述的精子稀釋液配制：在每升蒸餾水中加入葡萄糖60g、NaCl?10g、NaHCO3?0.5g；
所述的冷凍保存液配制：在精子稀釋液中加入體積比為10％的二甲基亞砜或10％的1，2-丙二醇；
所述的精子與冷凍保存液混合：冷凍保存液與七帶石斑魚精液以1∶1的比例稀釋，將稀釋精液1ml注入2ml冷凍管中；
所述的平衡和冷凍保存：在室溫下平衡5min，然后在-60--80℃的液氮蒸氣中平衡10min，之后直接將盛放冷凍管的小布袋，投入液氮中冷凍保存。
2.一種權利要求1所述方法冷凍保存的七帶石斑魚精子的應用，其特征在于它包括：1)解凍和精子活力檢測：冷凍精子在37℃水浴中解凍，鏡檢冷凍精子活力；2)受精：冷凍精子受精比例為1ml冷凍精子∶200ml未受精卵。
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