[發明專利]制備聚乙二醇化堿性成纖維細胞生長因子的方法有效
| 申請號： | 201110261405.7 | 申請日： | 2011-09-06 |
| 公開（公告）號： | CN102329395A | 公開（公告）日： | 2012-01-25 |
| 發明（設計）人： | 黃志鋒;李校堃;葉朝輝;王曉杰;張翼;唐璐 | 申請（專利權）人： | 溫州醫學院;黃志鋒 |
| 主分類號： | C07K17/08 | 分類號： | C07K17/08 |
| 代理公司： | 溫州甌越專利代理有限公司 33211 | 代理人： | 李友福 |
| 地址： | 325035*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 制備 聚乙二醇 堿性 纖維 細胞 生長因子 方法 | ||
1.制備聚乙二醇化堿性成纖維細胞生長因子的方法，其包括，
（1）將bFGF溶液上樣于肝素-Sepharose親和層析柱；
（2）用mPEG-丁醛溶液在避光狀態下沖洗肝素-Sepharose親和層析柱；
（3）用低鹽緩沖液洗去肝素-Sepharose親和層析柱中的雜質；
（4）用高鹽緩沖液對肝素-Sepharose親和層析柱洗脫，收集含PEG-bFGF的流出液；
（5）將步驟（4）獲得的流出液上樣于分子篩層析柱，并用低鹽緩沖液洗脫，收集含PEG-bFGF的流出液；和
（6）將步驟（5）獲得的流出液上樣于陽離子交換層析柱，收集用含NaCl的緩沖液洗脫的流出液。
2.根據權利要求1所述的制備聚乙二醇化堿性成纖維細胞生長因子的方法，其中步驟（5）中的分子篩層析柱是Sephadex?G-25層析柱。
3.根據權利要求1所述的制備聚乙二醇化堿性成纖維細胞生長因子的方法，其中步驟（6）中的陽離子交換層析柱是SP-Sepharose陽離子交換層析柱。
4.權利要求1-3之任一所述的制備聚乙二醇化堿性成纖維細胞生長因子的方法，其中低鹽緩沖液是10~30mM磷酸緩沖液，優選是20mM磷酸緩沖液。
5.根據權利要求1-3之任一項所述的制備聚乙二醇化堿性成纖維細胞生長因子的方法，其中高鹽緩沖液是含1.5~2.5M?NaCl的10~30mM磷酸緩沖液，優選是含2M?NaCl的20mM磷酸緩沖液。
6.根據權利要求1-3之任一項所述的制備聚乙二醇化堿性成纖維細胞生長因子的方法，其中含NaCl的緩沖液中NaCl含量是200~500mM，優選是350mM。
7.根據權利要求1-3之任一項所述的制備聚乙二醇化堿性成纖維細胞生長因子的方法，其中bFGF和mPEG-丁醛的摩爾比范圍介于1：1.25-1：30，優選是1：10。
8.根據權利要求1-3之任一項所述的制備聚乙二醇化堿性成纖維細胞生長因子的方法，其中步驟（2）中沖洗的時間為100~600分鐘，優選為200~400分鐘。
9.權利要求1-3之任一所述的方法，其中步驟（2）中沖洗的溫度為1~35℃，優選是4~25℃。
10.根據權利要求1-3之任一項所述的制備聚乙二醇化堿性成纖維細胞生長因子的方法，其中mPEG的分子量為10~80kDa，優選是20kDa。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于溫州醫學院;黃志鋒，未經溫州醫學院;黃志鋒許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201110261405.7/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
