[發(fā)明專利]一種華重樓根莖的慢速冷凍保存方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110259181.6
• 申請日: 2011-09-02
• 公開（公告）號: CN102258010A
• 公開（公告）日: 2011-11-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王躍華;田夢良;林抗雪;劉益麗;張玨;李文光;馬良良;張紅玉;陳燕;湯有舉
• 申請（專利權(quán)）人: 成都大學(xué)
• 主分類號: A01N3/00
• 分類號: A01N3/00
• 代理公司: 成都科奧專利事務(wù)所(普通合伙) 51101
• 代理人: 王蔚

1.一種華重樓根莖的慢速冷凍保存方法，其特征在于包括如下步驟：

(1)預(yù)處理：取華重樓根莖，先在4～8℃條件下放置15～20天，然后切成5～20mm³的塊狀，再置于預(yù)培養(yǎng)液：蔗糖4～7％+脯氨酸0.2～0.5％中預(yù)培養(yǎng)20～24小時；

(2)冷凍處理：將預(yù)培養(yǎng)后的華重樓根莖放入裝有保護(hù)劑的冷凍管中，先置于2℃冰箱中放置30～40min，然后再移置于-16℃的冰箱中并開始逐漸降溫，待溫度降至-24℃后放置30～60min，隨即迅速投入液氮中進(jìn)行保存，所述保護(hù)劑為：脫脂奶粉30～40％+脯氨酸1.0～1.5％；

(3)解凍以及洗滌：華重樓根莖在液氮中保存至少1周后，當(dāng)需要使用根莖時，將冷凍管取出，迅速放入恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行快速解凍，解凍完畢后，用0.4～0.5mol/L的蔗糖溶液進(jìn)行浸泡洗滌3～4次，每次10～15min，最后用蒸餾水沖洗干凈。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種華重樓根莖慢速冷凍保存方法，其特征在于：步驟(3)中恒溫培養(yǎng)箱的溫度為40～60℃。