[發明專利]一種抗菌肽緩釋微球制劑及其制備方法

無效

• 申請號: 201110256689.0
• 申請日: 2011-09-01
• 公開（公告）號: CN102274485A
• 公開（公告）日: 2011-12-14
• 發明（設計）人: 汪猜;皮燦輝;嚴卓添;肖小平;林艷晶
• 申請（專利權）人: 廣州和仕康生物技術有限公司
• 主分類號: A61K38/00
• 分類號: A61K38/00;A61K47/34;A61P31/04
• 代理公司: 廣州三環專利代理有限公司 44202
• 代理人: 郝傳鑫

技術領域

本發明涉及一種抗菌肽微球制劑及其制備方法，尤其涉及一種用于非靜脈給藥的長效抗菌肽緩釋微球制劑及其制備方法。

背景技術

抗菌肽是具有抗菌活性的一類短肽，廣泛存在于生物界，是先天免疫的重要防御成分，其殺細胞機制為在靶細胞膜上穿孔，靶細胞因滲透壓改變而死亡。抗菌肽具有廣譜抗菌活性，并不易產生耐藥性，有良好的應用前景。但是抗菌肽在體內容易被蛋白酶降解，體內循環半衰期短，患者需要頻繁給藥，不僅給患者帶來了較大的經濟負擔，還給患者帶來了給藥痛苦。因此，研究抗菌肽長效緩釋制劑具有重要的意義。

近年來，生物可降解的高分子材料廣泛應用于蛋白質多肽類藥物長效緩釋微球的制備，其中聚乳酸-羥基乙酸共聚物（PLGA），由于其良好的生物相容性和可生物降解性，已被美國FDA批準為藥用高分子輔料使用。以生物可降解材料作載體的緩釋微球注射制劑，順應了制劑學向長效、高效、低毒發展的方向，已成為三十年來藥劑學研究的一個熱點。它具有以下優點：①與普通注射劑相比，長效注射微球顯著延長給藥間隔，大大提高了病人用藥的依從性。②可以持續維持最低有效濃度，因而可以減少總的給藥劑量，減輕某些副作用。③生物可降解微球注射劑不需手術植入，僅肌肉注射，釋藥后載體可生物降解，其降解物被機體吸收，克服了以往植入劑使用上的不便，為患者提供了一種很好的給藥方式。

發明內容

本發明的目的是提供一種含抗菌肽的可生物降解緩釋微球，同時還提供一種制備所述含抗菌肽的可生物降解長效緩釋微球的方法。

為實現上述目的，本發明采取的技術方案為：一種抗菌肽緩釋微球制劑，包括載體聚乳酸-羥基乙酸共聚物，以及包封在所述載體中的抗菌肽。

在本發明所述抗菌肽緩釋微球制劑的一個優選實施例中，所述微球制劑的粒徑為40-100μm。

在本發明所述抗菌肽緩釋微球制劑的一個優選實施例中，所述聚乳酸-羥基乙酸共聚物的分子量為5000-100000，所述聚乳酸-羥基乙酸共聚物中，聚乳酸與聚羥基乙酸的質量百分比為25：75-85：15。優選地，所述聚乳酸-羥基乙酸共聚物中，聚乳酸與聚羥基乙酸的質量百分比為50：50-85：15；更優選地，所述聚乳酸-羥基乙酸共聚物中，聚乳酸與聚羥基乙酸的質量百分比為40：60-60：40。

一種如上所述抗菌肽緩釋微球制劑的制備方法，采用復乳溶劑揮發法，用生物可降解高分子材料聚乳酸-羥基乙酸共聚物為載體材料，包封抗菌肽，通過超聲或高速攪拌進行乳化，在低速攪拌下使有機溶劑揮發，形成聚合物緩釋微球，具體包括以下步驟：

（1）將聚乳酸-羥基乙酸共聚物溶于有機溶劑中，制成中油相；

（2）將抗菌肽溶于pH為5-7的緩沖液中，制成內水相；

（3）將步驟（2）制成的內水相溶液加入到步驟（1）制成的中油相中，其中內水相與中油相的體積比為2-20%，勻化，形成初乳；

（4）將步驟（3）制成的初乳滴加到含有聚乙烯醇的外水相分散介質中，其中初乳與外水相分散介質的體積比為1%-10%，勻化，形成復乳，除去有機溶劑后洗滌干燥，得含有抗菌肽的緩釋微球。

所述抗菌肽緩釋微球制劑的制備方法可分為以下幾個階段：

（一）初乳的制備（一次乳化）

將內水相與中油相溶液混合，盛裝于適當的容器中，冰浴，乳化，形成初乳。可采用間歇式超聲（135W，40KHz）法進行乳化，超聲的總時間為1-4min。但不限于超聲乳化，也可以采用攪拌方式乳化。

（二）復乳的制備（二次乳化）

取適量（體積范圍為初乳體積的10-100倍）的4℃預冷的外水相分散溶液，置于機械攪拌器上，在攪拌條件下加入初乳，進行第二次乳化（即復乳化），攪拌速度為1000-4000rpm，攪拌時間為1-5分鐘。

（三）溶劑的揮發

調整攪拌速度為400-600rpm，攪拌法揮發有機溶劑，溫度為室溫，溶劑揮發時間為3-4小時，得到硬化的微球。

（四）微球的洗滌及收集

采用離心法收集微球，用注射用水洗滌三次，用少量水懸浮后凍干，收集微球，于干燥器中保。微球長期不用時，需放置于4℃低溫環境下保存。

本發明所述抗菌肽緩釋微球制劑的制備方法的一個優選實施例中，所述步驟（1）中的有機溶劑為二氯甲烷或二氯甲烷與乙酸乙酯的混合液，所述二氯甲烷與乙酸乙酯的體積比為60：40-100：0。