[發明專利]高速逆流色譜法用于忍冬中分離制備出咖啡鞣酸的方法

無效

• 申請號: 201110253166.0
• 申請日: 2011-08-31
• 公開（公告）號: CN102381974A
• 公開（公告）日: 2012-03-21
• 發明（設計）人: 羅磊;朱文學;樊金玲;李欣;白喜婷;關隨霞;李鑫玲;郝英超
• 申請（專利權）人: 河南科技大學
• 主分類號: C07C69/732
• 分類號: C07C69/732;C07C67/48
• 代理公司: 洛陽市凱旋專利事務所 41112
• 代理人: 符繼超

1.一種高速逆流色譜法用于忍冬中分離制備出咖啡鞣酸的方法，該方法包括制備忍冬水取液、制備忍冬醇沉提取液、萃取制備咖啡鞣酸粗提液、制備固定相和流動相的溶劑體系、高速逆流色譜法分離純化過程五個工藝步驟，其特征是：所述五個工藝步驟分述如下：

①制備忍冬水取液

將忍冬干燥粉碎并過40目篩后裝于提取罐中并用去離子水進行浸提，忍冬與所述去離子水的重量比為1:8~10，所述去離子水的溫度控制在60~90℃，所述浸提的時間控制在1~2h，將所述去離子水+忍冬形成的浸提液趁熱過濾并冷卻，分別制備出忍冬水取液和忍冬殘留液；

②制備忍冬醇沉提取液

將①中制備出的所述忍冬水取液裝入第一反應皿中，再向第一反應皿加入無水乙醇直至反應皿中乙醇濃度達到體積百分比60~80%時為止，放置過夜后對所述忍冬水+乙醇進行過濾得到過濾液，再對所述過濾液進行減壓回收出乙醇并制備出忍冬醇沉提取液；

③萃取制備咖啡鞣酸粗提液

將②中制備出的所述忍冬醇沉提取液裝入第二反應皿中，再向第二反應皿中加入乙酸乙酯進行萃取，所加乙酸乙酯與忍冬醇沉提取液的重量比為2:1，然后用質量百分比濃度為37.5%的鹽酸調節第二反應皿中的pH值直至達到pH=1~3為止，所述萃取時間控制在1~2h，最后收集出乙酸乙酯層并制備出咖啡鞣酸粗提液；

④制備固定相和流動相的溶劑體系

按體積比將乙酸乙酯:乙醇:水=1~5:1~2:2~5放在第三反應皿中進行混合組成溶劑體系，待靜置后第三反應皿中所述溶劑體系自然分為上相和下相，所述上相簡稱為固定相，所述下相簡稱為流動相，將所述固定相置于第四反應皿中，將所述流動相置于第五反應皿中；

⑤高速逆流色譜法分離純化過程

在第四反應皿中接入第一泵，在第五反應皿中接入第二泵，設定第一泵和第二泵的流速同為10ml/min，同時開啟第一泵和第二泵匯入高速逆流色譜儀的螺旋管；當所述溶劑體系從高速逆流色譜儀的管路出口流出時關閉第一泵，將第二泵的流速調節到1~3ml/min，然后同時啟動高速逆流色譜儀的主電機，主電?機轉速控制在700~1000r/min，高速逆流色譜儀的恒溫循環器溫度控制在20~50℃，待所述管路出口處只有所述流動相流出時其管路內溶劑體系達到動態平衡；最后通過高速逆流色譜儀的進樣閥注入10~30ml所述咖啡鞣酸粗提液，設定高速逆流色譜儀的檢測波長為327nm，最后根據高速逆流色譜儀顯示的檢測圖譜收集咖啡鞣酸。