[發(fā)明專利]香草醛-硫酸比色法測(cè)定光甘草定含量的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110230297.7
• 申請(qǐng)日: 2011-08-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102384907A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-03-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 樊金玲;張麥茹;朱文學(xué);李欣;唐浩國(guó)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 河南科技大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N21/78
• 分類號(hào): G01N21/78
• 代理公司: 洛陽(yáng)市凱旋專利事務(wù)所 41112
• 代理人: 符繼超

技術(shù)領(lǐng)域????

本發(fā)明屬于植物含量測(cè)定技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及到一種香草醛-硫酸比色法測(cè)定光甘草定含量的方法。

背景技術(shù)

光果甘草（Glycyrrhiza?glabra?L.）中所特含的異黃烷類簡(jiǎn)稱為光甘草定（Glabridin），異黃烷類具有多種多樣的藥物活性而備受關(guān)注。光甘草定的分子式為C₂₀H₂₀O₄?，分子量為324.37。?

有資料表明，光甘草定可用來(lái)作美白祛斑化妝品中的添加劑，通過(guò)抑制酪氨酸酶和多巴色素互變酶TRP-2的活性,?阻礙5,?6-?二羥基吲哚DHI的聚合來(lái)阻止黑色素的形成,?從而達(dá)到美白皮膚的效果。?

還有資料表明，光甘草定具有以下特性：?

（1）具有較強(qiáng)的抗氧化活性，抗氧自由基能力和維生素E相近；

（2）具有抗菌、抗胞毒、抗乳腺癌細(xì)胞增殖作用，以及明顯的降血壓、降血脂和較強(qiáng)的保護(hù)神經(jīng)作用，其應(yīng)用前景十分廣闊。

目前關(guān)于分析光甘草定含量的方式采用的是高效液相色譜法，高效液相色譜法所使用的高效液相色譜儀價(jià)格昂貴，檢測(cè)費(fèi)用高，檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)，對(duì)操作人員的要求也很高。?

雖然比色法是目前測(cè)定物質(zhì)含量較為常用的定量分析方法，然而在香草醛-硫酸條件下使用比色法測(cè)定光甘草定含量的方法至今未見(jiàn)報(bào)道。?

發(fā)明內(nèi)容

為解決上述問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種香草醛-硫酸比色法測(cè)定光甘草定含量的方法，該方法分為兩大步驟，第一步驟是顯色液吸光度值信息的采集過(guò)程，第二步驟是光甘草定標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)溶液-平均吸光度值的線性回歸方程建立過(guò)程，該方法所需要時(shí)間比高效液相色譜法大大縮短，并且顯色液在室溫60min內(nèi)穩(wěn)定可靠，非常適合大量待測(cè)光甘草定含量的集中檢測(cè)。?

為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：?

一種香草醛-硫酸比色法測(cè)定光甘草定含量的方法，該方法主要涉及到：光甘草定的標(biāo)準(zhǔn)品純度HPLC≥98%，無(wú)水甲醇，質(zhì)量百分比濃度是98%的硫酸，香草醛，恒溫水浴鍋，比色皿，紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)；該方法通過(guò)B環(huán)具有間苯二酚結(jié)構(gòu)且C環(huán)C₂、C₃是單鍵的光甘草定與香草醛試劑發(fā)生反應(yīng)并在質(zhì)量百分比濃度是98%的硫酸酸性條件下使反應(yīng)液顯色，再利用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定該顯色液在其最大吸收波長(zhǎng)534nm下的吸光度值，從而完成顯色液吸光度值信息的采集過(guò)程：在所述酸性條件下，顯色液的顏色深淺與光甘草定的含量呈顯著線性正相關(guān)關(guān)系，符合朗伯-比爾定律，從而為光甘草定標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)溶液-平均吸光度值的線性回歸方程建立奠定了基礎(chǔ)，所述線性回歸方程為以后待測(cè)光甘草定含量的測(cè)定提供了定量標(biāo)準(zhǔn)。

所述顯色液吸光度值信息的采集過(guò)程如下：?

①配制濃度為20?mg/mL?的香草醛甲醇溶液

用燒杯稱取2.0g的香草醛，向燒杯中加入少量無(wú)水甲醇以溶解香草醛，將溶解后的香草醛甲醇溶液轉(zhuǎn)移到100?mL的第一容量瓶中，再用少量無(wú)水甲醇潤(rùn)洗燒杯2-3次，并將潤(rùn)洗后的香草醛甲醇溶液也轉(zhuǎn)移到第一容量瓶中，再向第一容量瓶中加入無(wú)水甲醇溶液至100?mL刻度為止，搖勻后得到濃度為20?mg/mL的香草醛甲醇溶液。

②配制體積百分比濃度為30%的硫酸甲醇溶液?

用移液管準(zhǔn)確量取30?mL質(zhì)量百分比濃度是98%的硫酸并置于100?mL的第二容量瓶中，再向第二容量瓶中加入70?mL的無(wú)水甲醇，搖勻后得到體積百分比濃度為30%的硫酸甲醇溶液。

③配制濃度為0.5?mg/mL的光甘草定標(biāo)準(zhǔn)溶液?

用燒杯稱取12.5?mg光甘草定的標(biāo)準(zhǔn)品，向燒杯中加入少量無(wú)水甲醇以溶解光甘草定的標(biāo)準(zhǔn)品，將溶解后光甘草定的標(biāo)準(zhǔn)品甲醇溶液置于25mL的第三容量瓶中，再用少量無(wú)水甲醇潤(rùn)洗燒杯2-3次，并將潤(rùn)洗后光甘草定的標(biāo)準(zhǔn)品甲醇溶液也轉(zhuǎn)移到第三容量瓶中，再向第三容量瓶中加入無(wú)水甲醇溶液至25?mL刻度為止，搖勻后得到濃度為0.5?mg/mL的光甘草定標(biāo)準(zhǔn)溶液。

④配制一十四份濃度范圍在0.01～0.5?mg/mL的光甘草定標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)溶液?