[發明專利]一種同時分析人基因組DNA 22個基因座的熒光標記復合擴增的試劑盒及其使用方法和應用

無效

• 申請號: 201110229325.3
• 申請日: 2011-08-11
• 公開（公告）號: CN102321748A
• 公開（公告）日: 2012-01-18
• 發明（設計）人: 鄭衛國;夏子芳;杜蔚安;張秀芳;楊輝;周翔
• 申請（專利權）人: 無錫中德美聯生物技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;G01N21/64
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 李紀昌

1.一種同時分析人基因組DNA?22個基因座的熒光標記復合擴增的試劑盒，所述的22個基因座為：D3S1358、D13S317、D7S820、D16S539、Penta?E、D2S441、TPOX、TH01、D2S1338、CSF1PO、Penta?D、D10S1248、D19S433、vWA、D21S11、D18S51、D6S1043、D8S1179、D5S818、D12S391、FGA、性別基因座Amelogenin；其特征在于：該試劑盒包括22個基因座對應的引物如下：

。

2.根據權利要求1所述的一種同時分析人基因組DNA?22個基因座的熒光標記復合擴增的試劑盒，其特征在于：22個基因座對應的引物的濃度為：

。

3.根據權利要求1或2所述的一種同時分析人基因組DNA?22個基因座的熒光標記復合擴增的試劑盒，其特征在于所述的每個基因座對應的引物中至少有一個引物的5’端進行熒光染料標記。

4.根據權利要求3所述的一種同時分析人基因組DNA?22個基因座的熒光標記復合擴增的試劑盒，其特征在于所述的熒光染料標記物為6-FAM、HEX、TAMRA或ROX。

5.根據權利要求4所述的一種同時分析人基因組DNA?22個基因座的熒光標記復合擴增的試劑盒，其特征在于將所述22個基因座分組，具體為：D3S1358、D13S317、D7S820、D16S539、Penta?E和D2S441為第一組，該組基因座對應的引物的熒光標記物為6-FAM、HEX、TEMRA和ROX的任意一種；TPOX、TH01、D2S1338、CSF1PO、Penta?D和D10S1248為第二組，該組基因座對應的引物的熒光標記物為與第一組不同的熒光染料標記物；D19S433、vWA、D21S11、D18S51、D6S1043為第三組，該組基因座對應的引物的熒光標記物為與第一組和第二組都不同的熒光染料標記物；D8S1179、D5S818、D12S391、FGA，以及性別基因座Amelogenin為第四組，該組基因座對應的引物的熒光標記物為與第一組、第二組和第三組都不同的熒光染料標記物；該試劑盒還設有內標，其選用橙色熒光標記，熒光標記物為SIZ。

6.根據權利要求1-5任意一種所述的一種同時分析人基因組DNA?22個基因座的熒光標記復合擴增的試劑盒，其特征在于所述的試劑盒由如下組成：

組分體積Reaction Mix10.0 μL基因組DNA0.1-10ul含量為0.125-5ng權利要求1所述的引物5.0 μL熱啟動Taq酶（5U/ μL）0.5 μLsdH₂O補足至25.0μL

其中所述的Reaction?Mix為----.MgCl_2?7.5mM,?Tris-HCl?buffer?125mM,KCl?125mM,dNTPs?7.5m?M?,BSA?2mg/ml。